ORMDL3基因單核苷酸多態(tài)性與寧波兒童哮喘發(fā)病的關聯(lián)性的研究.pdf

1、背景與目的：
　　哮喘是當今世界最常見的慢性疾病之一。近20年來，哮喘發(fā)病率和死亡率持續(xù)增加，目前仍以每10年20％～50％的比例增長。哮喘是一種氣道慢性炎癥性疾病，其發(fā)生與發(fā)展主要由遺傳因素與環(huán)境因素相互作用的結果，遺傳因素對哮喘的相對作用為36～79％。目前國內、外學者通過對人群哮喘相關基因篩選定位及其多態(tài)性的研究，結果發(fā)現(xiàn)與人類哮喘有關的候選基因有261個，分布在22對常染色體和1對性染色體上，涉及的基因及單核苷酸多態(tài)性(S

2、NPs)眾多，國內外對相關基因的研究結果多有不一。Moffatt等人發(fā)表于自然期刊(Nature)的哮喘基因組相關研究（genome-wide associaton，GWAS）發(fā)現(xiàn)血清類粘蛋白1樣蛋白3(ORMDL3)基因是哮喘的易感基因，rs7216389基因型的多型性(polymorphism)與兒童哮喘的發(fā)作有關。目前國內關于該基因位點單核苷酸多態(tài)性（single-nucleotide polymorphism，SNP）的相關研究

3、報道較少，迄今未見寧波地區(qū)的相關報道。
　　本項目擬采用聚合酶鏈反應以及DNA測序方法，分析寧波地區(qū)哮喘兒童ORMDL3基因的SNPs，以期能夠明確該基因與寧波地區(qū)兒童哮喘發(fā)病的關聯(lián)性。主要是ORMDL3基因中rs7216389、rs4378650以及rs11650680位點SNPs與寧波地區(qū)兒童哮喘發(fā)病的關聯(lián)性。希望能夠進一步推動寧波地區(qū)兒童哮喘的防治。
　　材料與方法：
　　從2011年10月到2012年10月共收

4、集在寧波市北侖區(qū)人民醫(yī)院就診的兒童哮喘患者150例，符合《2008中國兒童哮喘指南》臨床診斷標準，包括初次診斷以及復診病例，均為寧波本地人口。其中男性82例，女性68例，平均年齡6.6±1.7歲。同期收集當時在寧波北侖區(qū)人民醫(yī)院住院的非呼吸道疾病患兒，排除既往有反復咳嗽、喘息病史的患兒，均為寧波本地人口，作為對照組，共150例，其中男性80例，女性70例，平均年齡7.5±1.3歲。由監(jiān)護人簽署知情同意書，并報告醫(yī)院倫理委員會備案。采集血

5、液標本，應用DNA抽提試劑盒提取實驗對象的基因組，采用聚合酶鏈反應(PCR)技術以及DNA測序方法對150例兒童哮喘患者ORMDL3基因多態(tài)性進行觀察，并與150例對照組進行對比。對兩組ORMDL3基因中rs7216389、rs4378650以及rs11650680位點等位基因頻率、基因型以及等位基因分布頻率進行統(tǒng)計學分析比較。
　　本研究主要采用SPSS13.0軟件進行分析。按照Hardy-Weiberg平衡法檢測樣本的群體代表

6、性。組間基因型及等位基因頻率等技術資料采用卡方檢驗，P＜0.05為統(tǒng)計學有差異。
　　結果：
　　1.哮喘組和對照組之間的性別、年齡無統(tǒng)計學差異，具有可比性。
　　2.哮喘組和對照組之間ORMDL3基因中rs7216389位存在三種基因型，即TT, TC和CC。ORMDL3基因rs7216389位點各基因型頻率在哮喘組和對照組相比，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。進一步分析發(fā)現(xiàn)，ORMDL3基因rs7216389位點

7、C和T等位基因分布頻率存在顯著性差異(P＜0.05)。
　　3.哮喘組和對照組之間ORMDL3基因中rs4378650位點存在三種基因型TT, TC，CC，哮喘組合對照組相比，ORMDL3基因rs4378650位點基因型分布頻率存在統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。并且此位點等位基因C和T的分布頻率存在顯著性差異(P＜0.05)。
　　4.哮喘組和對照組之間ORMDL3基因中rs11650680位均存在TT, TC和CC三種基因型