聲造影評估大鼠單側上尿路梗阻腎灌注改變.pdf

1、目的：探討超聲造影（Contrast-enhancedultrasounography，CEUS）技術及定量分析方法評估單側輸尿管梗阻大鼠模型腎血流灌注改變的應用價值，并與病理對照分析，為臨床無創(chuàng)定量評價梗阻性腎病的血流灌注提供理論依據(jù)。
　　 材料和方法：實驗對象為天津醫(yī)科大學動物中心育種的健康SD大鼠10只，所有大鼠行麻醉下手術結扎左側輸尿管建立單側輸尿管梗阻模型，每只大鼠分別于建模前和建模后7天進行CEUS檢查。
　

2、　 CEUS檢查于七氟烷吸入式麻醉狀態(tài)下進行，使用彩色超聲診斷儀(IU22型，荷蘭飛利浦公司)，L9-3線陣探頭，探頭使用頻率3～9MHz，將儀器調制到諧波狀態(tài)，幀頻15～20fps，機械指數(shù)設置到0.06，圖像深度約4.0cm，時間增益補償(timegaincompentation，TGC)曲線控制滑板全部至于中間位置，聚焦點設置在腎臟感興趣區(qū)（regionofinterest,ROI）中部，沿左腎長軸超聲探查。于鼠尾靜脈穿刺插管團

3、注注射用六氟化硫微泡（Sonovue，Bracco公司，瑞士）混懸液0.2ml，隨即推注生理鹽水1ml沖管。注射造影劑同時啟動圖像采集以實時觀察左腎血流灌注造影動態(tài)過程，連續(xù)采集6分鐘。15分鐘后如前所述順序再次注射造影劑行大鼠右側腎臟CEUS檢查。UUO術后7天CEUS檢查結束后立即處死大鼠取雙腎標本，利用1％福爾馬林固定后，行石蠟包埋切片和常規(guī)HE染色。
　　 CEUS結束后，使用QLAB軟件（版本號8.1，荷蘭飛利浦公司）

4、進行腎血流灌注定量分析。將ROI分別設置于與聲束垂直的腎皮質和腎髓質，描繪腎臟血流灌注時間-強度曲線(TIC)，再由TIC獲取相關參數(shù)，包括曲線上升支斜率(sloperateofascendingcurve，A);峰值強度（peakintensity，PI）;達峰時間(timetopeak，TTP);曲線下面積(areaundercurve，AUC)。
　　 使用SPSS16.0統(tǒng)計軟件處理所得數(shù)據(jù)，各測量值用均數(shù)±標準差((x

5、)±s)表示。統(tǒng)計方法采用兩獨立樣本資料的t檢驗，P＜0.05認為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結果：
　　 1.CEUS結果:10只大鼠除1只大鼠死于麻醉意外，其余9例完成UUO模型術前和術后檢查。9只大鼠UUO術前與術后梗阻側及健側腎臟超聲造影劑顯影順序相同，首先腎動脈顯影，繼而腎皮質顯影，最后腎髓質顯影;廓清順序則與增強順序相反。UUO造模術后7天梗阻側腎皮質較術前灌注速度明顯減慢，增強程度減低、造影劑廓清時間延長;腎

6、髓質較術前灌注速度減慢，造影劑廓清時間延長，但增強程度變化不大;健側腎皮質較術前血流灌注速度、增強程度變化不大，但造影劑廓清時間延長;健側髓質較術前血流灌注速度、強度及造影劑廓清時間變化不大。
　　 2.超聲定量分析結果:UUO術后梗阻側腎皮質血流灌注曲線較術前上升及下降均緩慢，TTP顯著延長（術前21.27±4.08s，術后27.42±6.17s，）(P＜0.05)，A（術前1.81±0.45dB/s，術后0.88±0.79d

7、B/s，）(P＜0.05)及PI（術前16.50±1.36dB，術后13.60±2.64dB）（P＜0.05）較術前均明顯減低，AUC(術前1309.40±306.93dB.s，術后1508.43±481.56dB.s)(P＜0.05)較術前明顯增高;梗阻側腎髓質血流灌注曲線較術前上升及下降均緩慢，TTP（術前25.59±3.92s，術后28.48±4.67s）(P＜0.05)，TTP較術前明顯增高，但A、PI和AUC較術前無明顯變化（

8、P＞0.05）;健側腎皮質血流灌注曲線與術前30s之內相似，30s后曲線下降緩慢，AUC（術前1209.94±298.41dB.s，術后1311.50±406.14dB.s）(P＜0.05)較術前明顯增高，A、PI和TTP較術前無明顯變化（P＞0.05）;健側腎髓質血流灌注曲線較術前無明顯變化，A、PI、TTP和AUC較術前無明顯變化(P＞0.05)。
　　 3.病理檢查結果UUO術后7天CEUS檢查結束后立即處死大鼠取雙腎標本

9、，置于1％福爾馬林溶液固定后，行石蠟包埋切片和常規(guī)HE染色。所有9只梗阻側腎臟均較健側腎臟體積明顯增大，梗阻側腎呈缺血狀顏色改變，腎盂腎盞擴張，腎乳頭變平乃至消失，腎實質變薄，皮髓質分界欠清晰;鏡下，梗阻側腎臟近曲小管及遠曲小管均出現(xiàn)不同程度的擴張，腎間質均出現(xiàn)單核巨噬細胞及淋巴細胞的浸潤，腎間質水腫增寬，其中2例腎小管萎縮(22.2％，)提示早中期腎纖維化形成。健側腎臟大體及鏡下檢查較正常狀態(tài)改變不大。
　　 結論：CEUS及