鎘誘導豬腎近曲小管上皮細胞（LLC-PK-,1-）凋亡及其機理的研究.pdf

1、該課題以豬腎近曲小管上皮細胞LLC-PK<,1>為對象,擬探討鎘誘導LLC-PK<,1>細胞凋亡及其機制,為進一步研究鎘對腎毒性的機制提供科學依據(jù).第一部分有、無血清對鎘抑制LLC-PK<,1>細胞增殖的影響用四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法比較有、無小牛血清細胞存活率,Image-Pro Plus軟件系統(tǒng)拍攝有、無血清細胞光學形態(tài)變化.結果發(fā)現(xiàn):相同濃度CdCl<,2>作用8h、12h后,有血清條件下的細胞存活率明顯高于無血清條件下的存

2、活率.無血清條件下,40μmol/LCdCl<,2>作用LLC-PK<,1>細胞12h,視野下幾乎全部為懸浮細胞;在有血清的條件下,40μmol/LCdCl<,2>作用12h,僅部分細胞懸浮,大多仍為正常貼壁細胞.在相同鎘濃度作用下,光鏡觀察顯示,無血清條件下的細胞損傷較有血清條件下嚴重.第二部分鎘誘導LLC-PK<,1>細胞凋亡的研究MTT比色法檢測CdCl<,2>對細胞的毒性效應;用透射電鏡觀察細胞核結構、瓊脂糖凝膠電泳和流式細胞儀

3、測定細胞凋亡率和分析細胞周期變化,以確定鎘是否可以誘導LLC-PK<,1>細胞凋亡.第三部分鎘誘導LLC-PK<,1>細胞凋亡及對bcl-2、p53、C-myc、C-fos與ras基因表達的影響采用流式細胞儀分別測定bcl-2、p53、c-myc、c-fos與ras基因表達產物.第四部分鎘誘導LLC-PK<,1>細胞凋亡與脂質過氧化的關系及VitC、VItE、硒與鎘聯(lián)合作用對LLC-PK<,1>細胞脂質過氧化的影響研究CdCl<,2>及