二烯丙基二硫?qū)θ税籽L-60細(xì)胞株增殖的影響及其機(jī)制探討.pdf

1、目的:探討二烯丙基二硫(diallyl disulfide，DADS)對(duì)人白血病HL-60細(xì)胞株增殖的影響及SUrVivin蛋白表達(dá)的變化和細(xì)胞周期的改變之間的關(guān)系，從而探討DADS的抗白血病機(jī)制。 方法:采用MTT法觀察。DADS對(duì)體外培養(yǎng)的HL-60細(xì)胞增殖的影響；應(yīng)用SP-免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)藥物作用前后白血病HL-60細(xì)胞內(nèi)survivin蛋白的含量；同時(shí)用流式細(xì)胞儀(FCM)檢測(cè)細(xì)胞周期變化。 結(jié)果:DADS對(duì)H

2、L60細(xì)胞具有明顯的生長(zhǎng)抑制效應(yīng)。其對(duì)HL60細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率與藥物濃度、時(shí)間有明顯依賴關(guān)系(r>0.9，P<0.01)。0.625mg/LDADS干預(yù)HL-60細(xì)胞24小時(shí)，細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率為8.94％，隨著濃度增加，時(shí)間延長(zhǎng)，20.0mg/L的DADS作用HL-60細(xì)胞72小時(shí)后，細(xì)胞抑制率升高至70.66％。SP免疫組化顯示空白對(duì)照組及DMSO溶媒對(duì)照組均有survivin蛋白的高表達(dá)，其染色強(qiáng)度指數(shù)(SII)分別為1125及112

3、6，兩者無(wú)顯著性差異(P>0.05)。5、10、20mg/L的DADS作用于HL-60細(xì)胞24、48及72小時(shí)能呈時(shí)間、濃度依賴性下調(diào)survivin蛋白的表達(dá)(r>0.9，P<0.01)，20mg/L的DADS作用于HL-60細(xì)胞72小時(shí)，SII為119，survivin蛋白表達(dá)抑制最為明顯。三個(gè)DADS濃度組間差異顯著(P<0.01)，與空白對(duì)照組比較也有顯著性差異(P<0.01)。流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果提示，伴隨著Survivin蛋白