癌相關(guān)成纖維細(xì)胞與頭頸部鱗癌細(xì)胞分化的相關(guān)性研究.pdf

1、目的:頭頸部鱗狀細(xì)胞癌(Head and neck squamous cell carcinoma，HNSCC)是頭頸部常見惡性腫瘤，易轉(zhuǎn)移，致死率高。腫瘤干細(xì)胞(Cancer stem cells，CSCs)是腫瘤組織中數(shù)量極少的具有自我更新能力和多種分化潛能的一類細(xì)胞。腫瘤微環(huán)境中還存在一類特殊的間質(zhì)細(xì)胞即癌相關(guān)成纖維細(xì)胞(Cancer-associatefibroblasts，CAFs)。本實驗?zāi)康臑闄z測HNSCC中CSCs的分布

2、情況及其與CAFs數(shù)量的相關(guān)性，進而探討CAFs在體外與HNSCC細(xì)胞分化的相關(guān)性。
　　材料方法:本研究選取17例HNSCC臨床病理組織制作石蠟切片，采用免疫組織化學(xué)染色的方法檢測組織中CD44、脫氫酶1(Aldehyde dehydrogenase-1，ALDH1)、CD133和α-SMA的表達(dá)情況，免疫組織化學(xué)染色結(jié)果用ImagePro Plus6.0軟件進行量化分析，所得實驗數(shù)據(jù)采用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計分析。選取兩

3、種HNSCC細(xì)胞和CAFs，其中兩種HNSCC細(xì)胞分別為:UM-SCC6和SCC原代細(xì)胞(PSCC)。PSCC和CAFs分別從HNSCC手術(shù)組織中新鮮提取。本研究對兩種HNSCC細(xì)胞分別應(yīng)用三種不同培養(yǎng)條件:常規(guī)培養(yǎng)、CAFs條件培養(yǎng)基培養(yǎng)和與CAFs共培養(yǎng)，用細(xì)胞免疫熒光染色的方法檢測三種培養(yǎng)條件下HNSCC細(xì)胞中CD44和ALDH1的表達(dá)。CAFs條件培養(yǎng)基收集自處于對數(shù)生長期的CAFs的細(xì)胞混懸液，離心去細(xì)胞沉淀后取上清液。HNS

4、CC細(xì)胞與CAFs共培養(yǎng)時細(xì)胞的接種比例為HNSCC: CAFs=1∶10。
　　結(jié)果:(1)對17例HNSCC病理組織進行免疫組織化學(xué)染色發(fā)現(xiàn)，CD44主要表達(dá)在細(xì)胞膜上，隨著惡性程度的增強，表達(dá)逐漸增多，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）;ALDH1主要表達(dá)在腫瘤細(xì)胞胞漿內(nèi)，表達(dá)量與腫瘤分化程度無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）;CD133在17例HNSCC病理組織中均未見表達(dá)。α-SMA主要表達(dá)在腫瘤間質(zhì)細(xì)胞胞漿內(nèi)，隨著腫瘤惡性程

5、度的增強，表達(dá)逐漸增多，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);CD44與α-SMA的表達(dá)量之間正相關(guān)（r=0.647，P＜0.05），ALDH1與α-SMA的表達(dá)量之間無相關(guān)性(P＞0.05)。
　　(2)細(xì)胞免疫熒光染色結(jié)果顯示普通培養(yǎng)條件下UM-SCC6和PSCC均未見CD44和ALDH1的表達(dá)。在添加CAFs條件培養(yǎng)基和與CAFs共培養(yǎng)的條件下，UM-SCC6和PSCC中均可見部分細(xì)胞表達(dá)CD44和ALDH1。
　　結(jié)論