MK反義寡核苷酸對宮頸鱗癌Hela229細胞中MK表達影響的研究.pdf

1、10459公開文學論大位州學鄭士碩(科學學位)MK反義寡核昔酸對宮頸鱗癌Hela229細胞中MK表達影響的研究院系名稱:鄭州大學基礎醫(yī)學院學科門類:醫(yī)學專業(yè)名稱:病理學與病理生理學作者姓名:王向紅導師姓名、職稱:陳奎生教授李最磊博士二零零九年一月鄭州大學2(X)9屆碩十研究生畢業(yè)論文MK反義寡核普酸對宮頸鱗箱Hela229細胞中以表達形響的研究材料和方法1.材料60例宮頸鱗癌組織、29例CIN組織及48例正常宮頸組織為平煤集團公司總醫(yī)院

2、及鄭州大學三附院2004年3月至2008年12月間手術切除標本人宮頸鱗癌Hela229細胞由中科院上海細胞生物學研究所提供。2.方法(1)采用免疫組織化學、原位雜交技術檢測宮頸鱗癌組織、CIN組織及正常宮頸組織中MK蛋白及mRNA表達(2)設計合成2條MK反義寡核昔酸(ASODN:、ASOD從)及1條無關序列寡核昔酸(N一ODN)(3)分別采用150林歲ml、200卜留ml、250林歲ml3種不同濃度的MKAsoDN、ASODN:和N一

3、ODN體外分組轉染培養(yǎng)的Hela229細胞48h和72h。另設細胞空白對照(不進行任何操作)(4)采用免疫細胞化學方法及完整細胞原位雜交方法觀察MKASODN對Hela229細胞中MK蛋白和mRNA表達的影響。(5)運用sPSs11.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析。陽性率之間的比較采用x’檢驗:計量資料以均數(shù)士標準差(X士S)表示，兩組均數(shù)的比較運用兩樣本t檢驗(只est)兩組以上均數(shù)比較采用方差分析(ANVOA)以a=0.05為檢驗水準。結

4、果1.MK蛋白及mRNA的表達:MK蛋白及m丑NA在宮頸鱗癌組織、CIN組織中存在表達，而在正常宮頸組織中未見表達。蛋白陽性染色位于宮頸鱗癌組織及CIN組織細胞膜和(或)細胞質中，呈棕黃色顆粒MKmRNA定位于宮頸鱗癌組織及CIN組織細胞質內，呈藍紫色顆粒。2.免疫組織化學結果:正常宮頸上皮組織、CIN組織及宮頸鱗癌組織中MK的蛋白陽性表達率分別為0.000，0(0’s)、20.690，0(629)和65.000，0(39巧。)。x’檢