普羅帕酮在家兔體內(nèi)的死后分布、死后彌散及保存犬檢材中的分解動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、目的:
　　 1.建立普羅帕酮死后分布、死后彌散研究動(dòng)物模型；建立保存檢材中分解動(dòng)力學(xué)研究(動(dòng)物)模型。
　　 2.研究普羅帕酮在家兔體內(nèi)的死后分布、死后彌散及保存犬檢材中的分解動(dòng)力學(xué)規(guī)律，為普羅帕酮中毒(死)案件的法醫(yī)學(xué)鑒定提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:
　　 1.死后分布：9只家兔按8LD50劑量普羅帕酮(440mg/kg)灌胃染毒，待血壓、呼吸和心電全部消失后，迅速提取心、肝、脾、肺、腎、腦、右下肢肌

2、、心血、尿、膽汁、玻璃體液冷凍保存，高效液相色譜(HPLC)內(nèi)標(biāo)法定量檢測(cè)普羅帕酮含量。
　　 2.死后彌散：家兔15只，隨機(jī)分成5組。夾閉氣管處死后1小時(shí)，按8LD50劑量普羅帕酮(440mg/kg)灌胃染毒，置于室溫，分別于染毒后4h、8h、12h、18h、24h各隨機(jī)解剖3只動(dòng)物，取心血、膽汁、尿、玻璃體液、右下肢肌肉、胸肌、心、肝、脾、肺、左腎、右腎、腦，置于-20℃冰箱內(nèi)保存。HPLC法檢測(cè)檢材中普羅帕酮含量。

3、　　 3.保存檢材中的分解動(dòng)力學(xué)：6只犬按4LD50劑量灌胃。1小時(shí)后處死動(dòng)物，分別提取心血和肝。每只犬心血和肝分三等份分別置于20℃、4℃、-20℃冰箱內(nèi)保存；分別于0小時(shí)、24小時(shí)、72小時(shí)、5天、7天、30天、60天、120天、180天、240天、300天，采用HPLC法檢測(cè)其中普羅帕酮含量；WinNorLin藥代動(dòng)力學(xué)軟件處理保存檢材平均藥物濃度-時(shí)間數(shù)據(jù)，AIC信息判據(jù)判定動(dòng)力學(xué)模型，計(jì)算消除動(dòng)力學(xué)方程和參數(shù)。
　　

4、 4.統(tǒng)計(jì)方法：實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，多樣本均數(shù)比較采用方差分析，各組數(shù)據(jù)用SPSS11.5軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)。
　　 結(jié)果:
　　 1.死后分布染毒死亡家兔體內(nèi)普羅帕酮含量由大到小依次為：膽汁(109.59±66.25μg/mL)＞肺(78.60±37.82μg/g)＞肝(47.11±53.90μg/g)＞腎(20.57±12.78μg/g)＞脾(20.09±15.02μg/g)＞尿(20.05±18.

5、85μg/mL)＞心血(12.99±15.87μg/mL)＞心(7.47±10.63μg/g)＞腦(5.62±5.99μg/g)＞玻璃體液(2.10±3.51μg/mL)＞右下肢肌肉(1.96±1.61μg/g)。
　　 2.死后彌散家兔死后普羅帕酮染毒，除玻璃體液和腦在4小時(shí)未檢出外，其他所取檢材中均檢出普羅帕酮。肝、脾、右腎、左腎、尿、肌肉(右下肢)中普羅帕酮含量在死后染毒12小時(shí)達(dá)高峰，繼后下降；玻璃體液、膽汁、肺、腦、心

6、、心血、胸肌中普羅帕酮含量在死后染毒18小時(shí)達(dá)高峰。其中膽汁、腦、心中普羅帕酮含量在死后染毒24小時(shí)內(nèi)呈時(shí)間依賴性遞增，而玻璃體液、肺、心血、胸肌中普羅帕酮含量在死后染毒18小時(shí)后呈下降趨勢(shì)。死后染毒4-8小時(shí)內(nèi)，家兔各組織(體液)中普羅帕酮最高濃度均較染毒致死家兔低(P＜0.05)；12-18小時(shí)內(nèi)，脾、左腎、心、心血、肌肉和玻璃體中最高濃度均較染毒致死家兔高(P＜0.05)，而膽汁、肝、肺、腦、尿、肌肉中最高濃度均較染毒致死家兔低(

7、P＜0.05)。
　　 3.保存檢材中分解動(dòng)力學(xué)不同溫度保存犬血液和肝臟中普羅帕酮含量均下降。保存5天內(nèi)血液和肝臟中普羅帕酮含量無(wú)顯著性變化(P＞0.05)，20℃、4℃和-20℃保存7天后檢材中普羅帕酮含量均呈時(shí)間依賴性遞減，肝臟和血液中分別由0時(shí)的100％減至37.77±5.93％、38.63±8.65％、42.81±20.27％(P＜0.05)和22.39±10.25％、19.87±7.73％、34.11±8.18％(P＜

8、0.05)。其分解動(dòng)力學(xué)符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)過(guò)程二室開放模型，可用Ct=C0-αt+Cte-βt表示。20℃、4℃、-20℃保存肝臟中普羅帕酮的快速分解半衰期(t1/2α)分別為3.6d(α=0.1907)、2.2d(α=0.3223)、9.6d(α=0.9629)，而慢速分解半衰期(t1/2β)分別為186.6d(β=0.0037)、172.5d(β=0.0040)、287.5d(β=0.0024)；20℃、4℃、-20℃保存血液中普羅帕酮

9、的快速分解半衰期(t1/2α)分別是2.5d(α=0.2763)、4.2d(α=0.1638)、10.7d(α=1.0228)，而慢速分解半衰期(t1/2β)分別是215.1d(β=0.0027)、242.1d(β=0.0024)、285.2d(β=0.0023)。根據(jù)Ct=C0-αt+Cte-βt方程計(jì)算的各樣本中普羅帕酮含量理論值與實(shí)測(cè)值接近。
　　 結(jié)論:
　　 1.采用8LD50劑量(兔)、4LD50劑量(犬)普

10、羅帕酮灌胃染毒，建立了普羅帕酮的死后分布、死后彌散、保存檢材中分解動(dòng)力學(xué)動(dòng)物模型；建立了生物檢材中普羅帕酮的高效液相色譜檢測(cè)方法?？蓱?yīng)用于普羅帕酮中毒(死)的法醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)和法醫(yī)毒物動(dòng)力學(xué)研究。
　　 2.8LD50劑量普羅帕酮染毒致死家兔體內(nèi)普羅帕酮含量由高到低依次為膽汁、肺、肝、脾、腎、尿、心血、心、腦、玻璃體、肌肉。其中膽汁、肺、肝中濃度最高，玻璃體和右下肢肌肉中含量最低。提示除血外，膽汁、肺、肝也可作為普羅帕酮中毒(死)案件

11、法醫(yī)學(xué)鑒定的毒物分析檢材。
　　 3.普羅帕酮在家兔體內(nèi)可發(fā)生死后彌散，僅死后染毒較短時(shí)間內(nèi)玻璃體液和腦中未檢出普羅帕酮；同劑量(8LD50)死后染毒家兔脾、左腎、心、心血、肌肉和玻璃體液中普羅帕酮最高濃度可高于灌胃染毒致死家兔。
　　 4.普羅帕酮在保存犬血液和肝臟中可發(fā)生分解。5天內(nèi)保存檢材中普羅帕酮含量相對(duì)穩(wěn)定，7天后其含量呈時(shí)間依賴性遞減，顯著降低；低溫保存可減慢其分解速度。普羅帕酮中毒(死)案件的法醫(yī)學(xué)鑒定中，