雙孢蘑菇疣孢霉病病原菌培養(yǎng)特性與化學防治研究.pdf

1、雙孢蘑菇（Agaricus bisporus）是一種重要的廣泛栽培的食用菌。疣孢霉病是雙孢蘑菇生產(chǎn)上的重要病害之一，經(jīng)常造成嚴重的經(jīng)濟損失，制約了雙孢蘑菇產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。本文對雙孢蘑菇疣孢霉病病原菌進行了分離鑒定和培養(yǎng)特性研究，調(diào)查了疣孢霉病的發(fā)生規(guī)律，開展了室內(nèi)藥劑篩選和田間藥劑防治試驗。
　　 采用常規(guī)組織分離法從發(fā)病子實體上分離到一種真菌，對該菌株進行了形態(tài)學觀察、致病性驗證及rDNA-ITS序列分析。根據(jù)柯赫氏法則進行的致病

2、性驗證的結果表明，采用該菌株菌絲塊、分生孢子懸浮液分別接種雙孢蘑菇子實體，均能產(chǎn)生典型的疣孢霉病癥狀。病原菌在PDA培養(yǎng)基上的菌落較圓，菌絲初為白色，之后漸成褐色，邊緣整齊。根據(jù)形態(tài)學和rDNA-ITS序列分析結果，確定雙孢蘑菇疣孢霉病的病原菌為有害疣孢霉菌（Mycogone perniciosa）。
　　 在供試的9種培養(yǎng)基中，有害疣孢霉菌在CYM、PSA、PDA上生長最快，在查氏培養(yǎng)基上生長最慢。在PDA上產(chǎn)孢最多，CYM上

3、產(chǎn)孢最少。菌絲生長最適溫度為23℃，不能在31℃及以上溫度下生長。在pH3-11范圍內(nèi)均可以生長，其中pH5-6時生長最快。最適碳源為果糖;最適氮源為硝酸鉀。在C濃度為8g/L，C∶N為160∶1時，菌絲長速最快。
　　 在盆栽試驗中發(fā)現(xiàn)，覆土中添加有害疣孢霉菌孢子能抑制雙孢蘑菇菌絲的生長，但也會使雙孢蘑菇提早出菇3d左右。根據(jù)癥狀表現(xiàn)制定分級標準，將雙孢蘑菇疣孢霉病發(fā)生嚴重程度分為5級，以計算病情指數(shù)。在福建省漳州市進行田間發(fā)

4、病情況觀察發(fā)現(xiàn)，第1潮雙孢蘑菇子實體采收前就開始發(fā)生疣孢霉病，隨著時間的推移，病情進一步擴展蔓延，發(fā)病程度呈現(xiàn)逐漸上升趨勢。第2潮和第4潮是疣孢霉病發(fā)生的兩個快速增長期，發(fā)病率增長速度分別達到183.40％和125.91％，病情指數(shù)增長速度分別為201.74％和160.76％。
　　 供試8種藥劑都是我國允許在食用菌或者果蔬上使用的農(nóng)藥。室內(nèi)毒力試驗測定顯示，各藥劑在不同濃度下對有害疣孢霉菌菌絲生長都有抑制作用，其中咪鮮胺錳鹽的

5、效果最好，其為百菌清，代森錳鋅效果最差，EC50值分別為0.048μg/mL、3.678μg/mL和33.518μg/mL。復篩試驗中，雙孢蘑菇菌絲對百菌清敏感性最高，其次為咪鮮胺錳鹽，對代森錳鋅敏感性最低，EC50值分別為10.474μg/mL、24.355μg/mL和118.244μg/mL。采用供試藥劑對有害疣孢霉菌和雙孢蘑菇EC50值之比，計算選擇性指數(shù)。咪鮮胺錳鹽的選擇性指數(shù)最小(SD=0.002)，其次為代森錳鋅(SD=0.

6、283)，最后為百菌清(SD=0.351)。這意味著，咪鮮胺錳鹽對有害疣孢霉菌的抑制作用大，對雙孢蘑菇影響較小，為合適的藥劑。
　　 在第一次田間防治試驗中，采用在覆土中接種107個/m2的有害疣孢霉菌孢子，咪鮮胺錳鹽、代森錳鋅和百菌清這3種供試藥劑各3個濃度以拌土或者噴霧兩種方式施藥。試驗結果顯示，各藥劑處理組的防治效果和病情指數(shù)有著顯著差異，50％咪鮮胺錳鹽WP稀釋2000倍拌土或者5000倍噴霧的效果最好，防效分別93.1