編碼H-NS-like蛋白的xrvA基因在水稻黃單胞菌的毒力及其他細(xì)胞過(guò)程的調(diào)控分析.pdf

1、水稻黃單胞菌水稻致病變種（以下簡(jiǎn)稱(chēng)Xoo）是一種能引起水稻白葉枯病的植物病原細(xì)菌。黃單胞菌屬中已測(cè)序菌株的序列分析表明xrvA基因是高度保守的，其基因注釋為黃單胞菌屬毒力調(diào)節(jié)因子。Xoo13751菌株中xrvA基因編碼產(chǎn)物XrvA蛋白含有一個(gè)H-NS結(jié)構(gòu)域。H-NS蛋白是一類(lèi)廣泛存在于革蘭氏陰性病原細(xì)菌中的模式調(diào)控蛋白，它們能與細(xì)菌的類(lèi)核結(jié)合并在很大范圍內(nèi)調(diào)控原核生物的基因表達(dá)調(diào)控。
　　 本實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建了xrvA基因的整合突變體

2、菌株和xrvA過(guò)量表達(dá)菌株，初步表型檢測(cè)發(fā)現(xiàn)該基因與Xoo毒力有關(guān)。本研究通過(guò)大量表型分析表明：xrvA基因整合突變后，顯著降低了對(duì)宿主植株水稻的毒力；延遲在非宿主蓖麻引發(fā)HR反應(yīng)；胞外多糖合成量、DSF因子產(chǎn)量與野生型菌株相比顯著降低，胞內(nèi)多聚糖原積聚量顯著增加；然而，xrvA基因整合突變后對(duì)胞外酶合成、細(xì)胞游動(dòng)性、生物膜形成和細(xì)胞表面吸附等細(xì)胞過(guò)程沒(méi)有影響。Northern雜交分析表明，xrvA基因整合突變導(dǎo)致hrpG、hrpX、r

3、pfC、，rpfF、rpfG和gumB等致病性相關(guān)基因在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)量相比野生型顯著降低。值得一提的是xrvA基因過(guò)量表達(dá)時(shí)，表型檢測(cè)結(jié)果與xrvA整合突變體引起的表型類(lèi)似，并且hrpX、rpfC、rpfF、rpfG和gumB等基因的表達(dá)量相比野生型亦顯著降低。此外，我們構(gòu)建了xrvA啟動(dòng)子-gusA的GUS報(bào)告質(zhì)粒pGUSxrvA，GUS酶活檢測(cè)和組織化學(xué)GUS染色結(jié)果表明，xrvA在基本培養(yǎng)基XOM2的表達(dá)顯著提高，在宿主植株體內(nèi)