巨噬細(xì)胞中no的作用機(jī)制

1、The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1998,discoveries concerning nitric oxide as a signaling molecule in the cardiovascular system,前言,當(dāng) 氮 氣 (nitrogen) 燃 燒 時 ， 便 會 產(chǎn) 生 氧 化 氮 (nitric acid) 1998 年 諾 貝 爾 醫(yī) 學(xué) 獎 ， 是 由

2、美 國 三 位 病 理 學(xué) 家 奪 得 ， 他 們 成 功 發(fā) 現(xiàn) 氧 化 氮 是 一 種 可 以 傳 遞 信 息 的 氣 體 NO創(chuàng)新世紀(jì),人物介紹,得獎的三位人物: Ferid Murad 、Robert F. Furchgott 、 Louis J. Ignarro 三位得獎人皆於美國從事研究工作,Ferid Murad,Ferid Murad本人是臨床醫(yī)師又是藥理學(xué)研究者，他分析硝化甘油與相關(guān)之血管擴(kuò)張藥物是透過何種機(jī)轉(zhuǎn)

3、去發(fā)揮效果 於1977年發(fā)現(xiàn)：硝化甘油是經(jīng)由釋放NO而使得血管平滑肌放鬆的 Ferid的成就來自指導(dǎo)教授霍 (Theodore Hall),Louis J Ignarro,Louis於UCLE School of Medicine的分子及藥理研究部門裡進(jìn)行基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究 收集乙醯膽鹼刺激胸主動脈血管後所遺留之培養(yǎng)液做實(shí)驗Ignarro在 1997 年 2 月?lián)涡聞?chuàng)立的一氧化氮期刊的總編輯,Robert F. Furchg

4、ott,1970 年代中期Furchgott發(fā)現(xiàn)只能擴(kuò)張血管的乙醯膽鹼竟然還可收縮血管主要的研究為：藥物造成的血管內(nèi)皮細(xì)胞收縮及擴(kuò)張,心血管、巨噬細(xì)胞、神經(jīng)傳遞路徑統(tǒng)整,,NOS,一氧化氮合成酶(NOS, NO Synthetase))是由羅伯·佛契哥特（Robert F. Furchgott）於1980年在進(jìn)行兔的大動脈實(shí)驗時所發(fā)現(xiàn)。從那時開始，不同種類的一氧化氮合酶被分類成以下的異構(gòu)體：(1)第一型 (NOS-I)或

5、神經(jīng)性合成酶(nNOS)(2)第二型 (NOS-II)或誘發(fā)性合成酶(iNOS)(3)第三型 (NOS-III)或內(nèi)皮性合成酶(eNOS),NOS,組織型：nNOS 和 eNOS 是組合式，鈣和調(diào)鈣蛋白先組合成complex，此複合物再和 nNOS 或 eNOS 組合才能產(chǎn)生催化作用。誘發(fā)型：iNOS 是誘發(fā)式，不需要鈣和調(diào)鈣蛋白，細(xì)胞素可直接誘發(fā) iNOS 產(chǎn)生催化作用。由於不需要鈣和調(diào)鈣蛋白，iNOS 常一誘發(fā)就難以收拾，造成

6、一氧化氮的過度製造，引起嚴(yán)重後果。,,一氧化氮傳導(dǎo)信息的功能和作用機(jī)制隨製造其出來的地方而不同。功能主要有三種：(1)在血管內(nèi)皮：是使血管的平滑肌細(xì)胞放鬆而擴(kuò)張血管，而可以降低血壓。(2)在神經(jīng)突觸：當(dāng)作神經(jīng)傳導(dǎo)因子，和腦部學(xué)習(xí)及記憶有關(guān)。(3) 在巨噬細(xì)胞：可損壞腫瘤細(xì)胞而將其殺死或停止其繁殖。,NO在心血管扮演的角色,,Furchgott 的發(fā)現(xiàn),經(jīng)體外實(shí)驗証明乙醯膽鹼促進(jìn)血管肌條的收縮。此現(xiàn)象與體內(nèi)實(shí)驗結(jié)果不相符。 若管

7、內(nèi)皮組織的摩擦受損 ，則乙醯膽鹼無法使血管產(chǎn)生舒張的反應(yīng)。因而發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)皮細(xì)胞會釋血管擴(kuò)張因子(EDRF) 使血管平滑肌舒張。,發(fā)現(xiàn)活化guanylate cyclase(可將GTP轉(zhuǎn)化成cGMP)的酵素不僅存在於細(xì)胞膜上，也存在於細(xì)胞漿中。 細(xì)胞膜上的酵素可藉著刺激物與受器結(jié)合以後而活化，進(jìn)而使得guanylate cyclase 活化。 三氮化物、硝基氰酸鹽、三酸甘油酯含硝基之化合物均可使細(xì)胞漿中的guanylate cy

8、clase活化。,發(fā)現(xiàn)乙醯膽鹼刺激胸主動脈血管環(huán)後所遺留之培養(yǎng)液（內(nèi)含EDRF）可活guanylate cyclase。後來進(jìn)一步測量，發(fā)覺NO之產(chǎn)生量與guanylate cyclase活化量成正比，此一實(shí)驗証實(shí)他的推論：「EDRF即是NO」。,Furchgott 提出「乙醯膽鹼引發(fā)由內(nèi)皮細(xì)胞反應(yīng)的血管舒張現(xiàn)象」。他的「三明治」實(shí)驗引領(lǐng)了後續(xù)科學(xué)家的研究。他以兩組不同的動脈血管做實(shí)驗，一組維持原本的內(nèi)皮細(xì)胞層；一組將內(nèi)皮細(xì)胞層移除。,

9、一氧化氮作用的理論模式,神經(jīng)傳遞物質(zhì)或荷耳膜等訊息物質(zhì)在血液中循環(huán)並作用在血管的內(nèi)皮細(xì)胞層。,與接收器結(jié)合後，活化了內(nèi)皮細(xì)胞層，製造出NO。NO 為氣體擴(kuò)散並通透細(xì)胞膜進(jìn)入血液及動脈管壁中。,部分NO分子通過內(nèi)皮細(xì)胞層到達(dá)平滑肌細(xì)胞，穿透至細(xì)胞內(nèi)與guanylyl cyclase酵素結(jié)合並活化此酵素。,當(dāng)guanylyl cyclase被活化後，開始由GTP產(chǎn)生cyclic GMP Cyclic GMP，並發(fā)生連鎖反應(yīng)以活化myosin

10、,當(dāng)myosin受到活化後，肌肉收縮絲滑動分開造成肌肉細(xì)胞放鬆，血管便舒張。,Murad 的發(fā)現(xiàn),Murad 施予含有g(shù)uanylyl cyclase的組織氣體一氧化氮，發(fā)現(xiàn)cyclic GMP的量增加。,乙醯膽鹼刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生一因子-NO，通過並活化肌肉細(xì)胞，引起放鬆。,Ignarro 的發(fā)現(xiàn),Ignarro 提出 EDRF 使血管放鬆，他也用血紅素的光譜分析定義了EDRF分子。當(dāng)血紅素暴露在EDRF環(huán)境下，最大吸光值改變?yōu)樾碌?/p>

11、波長；而暴露於NO環(huán)境下，最大吸光值有相同幅度的改變。證明EDRF即為NO。,血紅素中暴露在內(nèi)皮細(xì)胞中（內(nèi)皮細(xì)胞受到刺激產(chǎn)EDRF）,血紅素直接暴露於NO 中,NO在血管內(nèi)皮的作用機(jī)制,含硝基之物質(zhì)釋放NO。產(chǎn)生之NO活化平滑肌的guanylate cyclase，進(jìn)而產(chǎn)生cGMP，cGMP使肌凝蛋白輕鏈去磷酸化，產(chǎn)生血管平滑肌舒張。,,(1) 血管內(nèi)的乙醯膽鹼和乙醯膽鹼受體結(jié)合，因而打開一個管道讓鈣離子進(jìn)入血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)。(2) 進(jìn)

12、入血管內(nèi)皮細(xì)胞的鈣離子需要和調(diào)鈣蛋白 1 先組合形成 2。(3) 然後 2 再和內(nèi)皮性一氧化氮合成酉每 (eNOS) 7 組合形成活化的內(nèi)皮性一氧化氮合成酉每 (eNOS) 8。,,(4) 活化的內(nèi)皮性一氧化氮合成酉每 (eNOS) 8 催化 L-精胺酸 (L-arginine) 製造 L-西瓜胺酸 (L-citrulline) 和一氧化氮 (NO)。(5) 血管內(nèi)皮細(xì)胞的一氧化氮 (NO) 滲透入血管平滑肌細(xì)胞。(6) 滲透入的

13、 NO 和guanylate cyclase)5 的輔因子原血紅素 (heme) 的鐵 (Fe) 離子結(jié)合，形成活化的 guanylate cyclase 6。,,(7) 活化的 (guanylate cyclase) 6 催化 GTP 製造 cGMP 。(8) cGMP 使控制平滑肌細(xì)胞收縮的鈣離子濃度下降。(9) 控制收縮的鈣離子濃度下降導(dǎo)致平滑肌放鬆，因而擴(kuò)張血管降低血壓。(10) 一氧化氮 (NO) 也可滲透回去血管內(nèi)，而

14、降低血小板間的聚集及降低血小板附著於內(nèi)皮細(xì)胞。,NO在神經(jīng)傳導(dǎo)上扮演的角色,,NO在神經(jīng)突觸的作用,作用,長期記憶(別組的題目)神經(jīng)傳遞精神分裂癥(動物模型),神經(jīng)傳遞,越來越多證據(jù)顯示， 一氧化氮扮演抑制性non-adrencrgic non-cholinergic(NANC)神經(jīng)之傳導(dǎo)物質(zhì)。動物實(shí)驗發(fā)現(xiàn)，當(dāng)鈣離子進(jìn)入這些神經(jīng)，釋放一氧化氮造成氣管擴(kuò)張，給與一氧化氮合成脢拮抗劑，可 完全抑制NANC神經(jīng)於氣管平滑肌之作用。人類之中

15、心與週圍呼吸道，一氧化氮也扮演同樣角色。抑制性NANC神經(jīng)為人類唯一的神經(jīng)性之氣管擴(kuò)張路徑，呼吸道病變其神經(jīng)反應(yīng)明顯降低，可能源於呼吸道發(fā)炎釋放過氧化基，加速一氧化氮失去活性，或者是因神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)之一氧化氮合成脢或guanylyl cyclasc功能喪失。一氧化氮合成脢拮抗劑最常應(yīng)用的是 L-NG momomethyl arginine (L-NMMA) 與 L-Ngargininc methylester ( L-NAME ) ． 作

16、用 機(jī)轉(zhuǎn)為和arginine競爭一氧化氮合成脢，導(dǎo)致一氧化氮合成減少，這些作用可經(jīng)由加入大量arginine而改善 。,精神分裂癥,精神分裂癥是影響1%人口的精神病學(xué)的病癥。 沒有治療，但是精神病癥狀可以對待與治療精神病的藥物。 病癥經(jīng)常首先出現(xiàn)於二十。 它是通常慢性的，并且多數(shù)受害者從未回到到工作或全時教育。,精神分裂癥,精神分裂癥是可能導(dǎo)致幻覺、錯覺和無積極性的一個嚴(yán)重和常見病。 記憶、社會認(rèn)知和其他智力能力的問題也是共同性。 精

17、神分裂癥的患者可以治療與精神抑製藥，但是治療不幫助認(rèn)知干擾或被削弱的社會作用到任何看得出的程度。 我們相信這歸結(jié)於一種不平衡狀態(tài)在腦子的氧化一氮系統(tǒng)，并且，如果這是實(shí)際情形，我們也許能開發(fā)一種全新的治療方式， “ 說藥物學(xué)家卡羅琳是。 在這些研究，率和老鼠被給了稱phencyclidine的一種藥物。 這種物質(zhì)在人導(dǎo)致a精神分裂癥像狀態(tài)。 ” 鼠和老鼠不變得精神分裂癥，但是藥物有它有在人的一個相似的作用在想法過程在嚙齒目動物到作

18、用， “ 說卡羅琳是。 使用幾個不同的行為模式』，學(xué)會容量、記憶和社會互作用的動物被測量了。 當(dāng)動物對待了與阻攔腦子一氧化氮生產(chǎn)的物質(zhì)，他們變得有抵抗性對精神分裂癥像phencyclidine的作用。 研究小組短期將創(chuàng)始一項耐心研究為了發(fā)現(xiàn)阻攔腦子氧化一氮生產(chǎn)是否在病人可能緩和認(rèn)知干擾有精神分裂癥。,中風(fēng),在中風(fēng)時，太多的鈣離子可能可以進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，使得一氧化氮 (NO) 過度製造，而對周圍的細(xì)胞造成毒性。因而美國約翰霍浦金斯的史

19、耐德 (SH Snyder) 等人便建議，如果能及時將這抑制劑傳送到腦部恰當(dāng)?shù)牟课?，使用神?jīng)性一氧化氮合成酶 (nNOS) 抑制劑也許可以減少中風(fēng)病人的神經(jīng)細(xì)胞損壞。,NO與巨噬細(xì)胞,,,巨噬細(xì)胞在受到發(fā)炎訊號的刺激後，會透過「誘導(dǎo)型一氧化氮合成」（inducible nitric oxide synthase, iNOS）的作用合成一氧化氮（NO）；巨噬細(xì)胞同時還會產(chǎn)生超氧自由基（superoxide anion），當(dāng)這兩種產(chǎn)物作用後

20、會形成過對病菌與癌細(xì)胞極具傷害力的過氧硝酸產(chǎn)物〔如硝酸（NO3-）和亞硝酸（NO2-）〕。,巨噬細(xì)胞中NO的作用機(jī)制,過多的NO,然而當(dāng)過氧硝酸產(chǎn)物數(shù)量過多時，反而會使正常細(xì)胞受到傷害。而且，如果巨噬細(xì)胞合成太多的一氧化氮，會刺激更多的LDL（低密度脂蛋白）氧化。氧化的LDL是巨噬細(xì)胞最喜愛的佳餚之一，待巨噬細(xì)胞把氧化的LDL好好地咀嚼一番之後，便成了滿口脂肪泡泡、行動遲頓的泡沫細(xì)胞。很快的泡沫細(xì)胞會壞死，並釋出大量的脂質(zhì)覆蓋在血管壁上

21、，原本柔軟而有彈性的血管壁逐漸變硬、變厚，加速動脈粥樣硬化的形成與惡化。,巨噬細(xì)胞產(chǎn)生硝酸根需要一種胺基酸──精胺酸(arginine），他由此證明巨噬細(xì)胞內(nèi)的一種特殊酵素，它可將精胺酸轉(zhuǎn)變成瓜胺酸（citrulline）和一種不穩(wěn)定的中間產(chǎn)物，再轉(zhuǎn)變成硝酸根及亞硝酸根。這種中間產(chǎn)物就是NO。,一氧化氮合成酶,誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（縮寫iNOS或NOS2)利用一氧化氮的氧化壓力（自由基），協(xié)助巨噬細(xì)胞在免疫系統(tǒng)中對抗病原體 。不需要鈣離子

22、和調(diào)鈣蛋白，細(xì)胞素可直接誘發(fā) iNOS 產(chǎn)生催化作用。若巨噬細(xì)胞中的iNOS 大量表現(xiàn)，則一氧化氮會過度製造，使一氧化氮對動物體造成傷害,利用和 L-精胺酸相似的構(gòu)造與一氧化氮合成酶 (NOS) 作用以減少L-精胺酸和一氧化氮合成酶作用的機(jī)會,NO合成酶抑制劑,當(dāng)巨噬細(xì)胞被細(xì)菌毒素或T淋巴球活化之後，能利用酵素反應(yīng)將精胺酸轉(zhuǎn)變成NO。高反應(yīng)力的NO就會殺死細(xì)菌或腫瘤細(xì)胞,NO 分子之影響與應(yīng)用,人 體 影 響 與 藥 物