丙酸桿菌耐酸菌株的選育及其應(yīng)用.pdf

1、近年來微生物法發(fā)酵生產(chǎn)丙酸受到了越來越多的關(guān)注。為解除發(fā)酵過程中存在的反饋抑制現(xiàn)象，研究人員從培養(yǎng)基優(yōu)化、代謝途徑及發(fā)酵過程調(diào)控等方面進(jìn)行了大量的研究。但是丙酸桿菌生產(chǎn)菌株的性能直接影響著丙酸的發(fā)酵效率，因此，篩選一株性能優(yōu)良的耐酸菌株對丙酸的發(fā)酵分離耦合工藝的建立以及工業(yè)化生產(chǎn)具有重要意義。
　　本論文以實(shí)驗(yàn)室保藏的費(fèi)氏丙酸桿菌F-0和產(chǎn)酸丙酸桿菌P-0為出發(fā)菌株，采用壓力篩選的方法，篩選出了具有優(yōu)良生產(chǎn)性能的耐酸菌株。本論文的

2、主要研究結(jié)果如下：
　　1、以實(shí)驗(yàn)室保藏的費(fèi)氏丙酸桿菌F-0為出發(fā)菌株，采用壓力篩選的方法，即逐漸提高環(huán)境選擇壓力（丙酸濃度），獲得了一株耐50g/L丙酸的費(fèi)氏丙酸桿菌，為費(fèi)氏丙酸桿菌耦合發(fā)酵聯(lián)產(chǎn)丙酸/維生素B12提供了優(yōu)良菌株。
　　2、以實(shí)驗(yàn)室保藏的產(chǎn)酸丙酸桿菌P-0為出發(fā)菌株，采用壓力篩選的方法，獲得了一株耐酸產(chǎn)酸性能良好的產(chǎn)酸丙酸桿菌菌株P(guān)-10。在搖瓶發(fā)酵168h時(shí)，丙酸濃度為49.66g/L，丙酸產(chǎn)率為0.3g/

3、(L·h)，較出發(fā)菌株P(guān)-0提高了53.04％。同時(shí)，7L發(fā)酵罐實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，耐酸菌株P(guān)-10的發(fā)酵周期為168h時(shí)，丙酸濃度達(dá)到55.63g/L，丙酸產(chǎn)率為0.33g/(L·h)，較搖瓶發(fā)酵又提高了10%。
　　3、考察了產(chǎn)酸丙酸桿菌P-10的產(chǎn)酸穩(wěn)定性，結(jié)果表明，搖瓶連續(xù)傳代8次后耐酸菌株P(guān)-10的產(chǎn)丙酸能力沒有明顯下降，顯示出了良好的產(chǎn)酸穩(wěn)定性。
　　4、考察了丁二酸對產(chǎn)酸丙酸桿菌P-10發(fā)酵的影響，結(jié)果表明，當(dāng)在培養(yǎng)

4、基中添加15g/L和20g/L的丁二酸時(shí)，耐酸菌株P(guān)-10的菌體生長未受到影響，產(chǎn)丙酸和丁二酸能力沒有降低；而出發(fā)菌株P(guān)-0產(chǎn)丙酸能力分別降低了16.38%和17.01%，產(chǎn)丁二酸能力分別降低了33.32%和36.07%，同時(shí)菌體生長能力也降低了30.32%和35.50%；與出發(fā)菌株P(guān)-0相比，耐酸菌株P(guān)-10耐受丁二酸的能力有了明顯提高。
　　5、考察了產(chǎn)酸丙酸桿菌P-10在分批補(bǔ)料發(fā)酵中的應(yīng)用。當(dāng)發(fā)酵進(jìn)行至84h和156h時(shí)，