小球藻生長(zhǎng)因子(CGF)中α-葡萄糖苷酶抑制劑的分離純化及鑒定.pdf

1、近年，隨著糖尿病發(fā)病率的日益上升，抗糖尿病藥物越來(lái)越受到重視。而通過(guò)α-葡萄糖苷酶抑制劑治療糖尿病是一種新的途徑，其已被廣泛用來(lái)降低餐后高血糖。目前臨床上運(yùn)用的α-葡萄糖苷酶抑制劑有三種，即阿卡波糖、伏格列波糖和米格列醇，但都因其相似的不良反應(yīng)而使其運(yùn)用受到一定的局限，所以從天然產(chǎn)物中選獲得更安全、高效的抑制劑是 II型糖尿病治療以及降糖保健食品開(kāi)發(fā)的研究熱點(diǎn)。
　　小球藻是一種高蛋白、高多糖、低脂肪、富含多種維生素及礦物質(zhì)的單細(xì)

2、胞藻類，具有多種營(yíng)養(yǎng)保健功能，其分布廣，生物量大，生長(zhǎng)繁殖速度快。CGF是小球藻有別于其他微藻的主要生物活性物質(zhì)，其中含有多種組分并且具有很多生理功能，如降血糖、血壓。因此，CGF在食品、飲料、保健品和醫(yī)藥等領(lǐng)域有著廣闊的應(yīng)用前景。到目前為止，關(guān)于小球藻生長(zhǎng)因子（CGF）是新型的α-葡萄糖苷酶抑制劑的進(jìn)一步分離純化的研究報(bào)道較少，而CGF的提取技術(shù)及其生理活性的研究已成為歐、美、日等國(guó)家和臺(tái)灣地區(qū)開(kāi)發(fā)小球藻的熱點(diǎn)。
　　針對(duì)CGF

3、的研究，本文主要圍繞三個(gè)方面進(jìn)行工作的開(kāi)展：CGF提取方法的確定，α-葡萄糖苷酶抑制劑篩選模型的建立及CGF活性成分分離純化及鑒定。
　　首先，在前期工作的基礎(chǔ)上，用高壓熱水提取法（最佳的CGF制備方法）對(duì)小球藻生長(zhǎng)因子（CGF）進(jìn)行提取，CGF產(chǎn)率為19.6％。高壓水提法制備的CGF提取率較高，并且操作簡(jiǎn)單、價(jià)格經(jīng)濟(jì)。
　　其次，建立了最佳的α-葡萄糖苷酶抑制劑篩選模型。結(jié)果顯示：當(dāng)?shù)孜餄舛葹?0mM，酶濃度為0.28U/

4、ml，反應(yīng)時(shí)間為30min時(shí)為最佳的酶促反應(yīng)條件。該最佳篩選模型靈敏度和可靠性較高。利用該篩選模型檢測(cè)CGF的抑制效果較好，且其濃度與抑制率成正比例關(guān)系。
　　再者，對(duì)CGF中的活性物質(zhì)進(jìn)行了初步鑒定。利用最佳篩選模型定量檢測(cè)CGF中大分子與小分子的抑制率，確定了活性成分所在區(qū)域。同時(shí)對(duì)活性成分的熱穩(wěn)定性和酸堿穩(wěn)定性進(jìn)行研究。結(jié)果顯示，CGF中的活性物質(zhì)主要存在于小分子中，且其抑制率較強(qiáng)，熱穩(wěn)定性良好，但酸堿穩(wěn)定性不太理想。