小球藻生長因子(CGF)中α-葡萄糖苷酶抑制劑的分離純化及鑒定.pdf

1、近年，隨著糖尿病發(fā)病率的日益上升，抗糖尿病藥物越來越受到重視。而通過α-葡萄糖苷酶抑制劑治療糖尿病是一種新的途徑，其已被廣泛用來降低餐后高血糖。目前臨床上運用的α-葡萄糖苷酶抑制劑有三種，即阿卡波糖、伏格列波糖和米格列醇，但都因其相似的不良反應而使其運用受到一定的局限，所以從天然產物中選獲得更安全、高效的抑制劑是 II型糖尿病治療以及降糖保健食品開發(fā)的研究熱點。
　　小球藻是一種高蛋白、高多糖、低脂肪、富含多種維生素及礦物質的單細

2、胞藻類，具有多種營養(yǎng)保健功能，其分布廣，生物量大，生長繁殖速度快。CGF是小球藻有別于其他微藻的主要生物活性物質，其中含有多種組分并且具有很多生理功能，如降血糖、血壓。因此，CGF在食品、飲料、保健品和醫(yī)藥等領域有著廣闊的應用前景。到目前為止，關于小球藻生長因子（CGF）是新型的α-葡萄糖苷酶抑制劑的進一步分離純化的研究報道較少，而CGF的提取技術及其生理活性的研究已成為歐、美、日等國家和臺灣地區(qū)開發(fā)小球藻的熱點。
　　針對CGF

3、的研究，本文主要圍繞三個方面進行工作的開展：CGF提取方法的確定，α-葡萄糖苷酶抑制劑篩選模型的建立及CGF活性成分分離純化及鑒定。
　　首先，在前期工作的基礎上，用高壓熱水提取法（最佳的CGF制備方法）對小球藻生長因子（CGF）進行提取，CGF產率為19.6％。高壓水提法制備的CGF提取率較高，并且操作簡單、價格經濟。
　　其次，建立了最佳的α-葡萄糖苷酶抑制劑篩選模型。結果顯示：當?shù)孜餄舛葹?0mM，酶濃度為0.28U/

4、ml，反應時間為30min時為最佳的酶促反應條件。該最佳篩選模型靈敏度和可靠性較高。利用該篩選模型檢測CGF的抑制效果較好，且其濃度與抑制率成正比例關系。
　　再者，對CGF中的活性物質進行了初步鑒定。利用最佳篩選模型定量檢測CGF中大分子與小分子的抑制率，確定了活性成分所在區(qū)域。同時對活性成分的熱穩(wěn)定性和酸堿穩(wěn)定性進行研究。結果顯示，CGF中的活性物質主要存在于小分子中，且其抑制率較強，熱穩(wěn)定性良好，但酸堿穩(wěn)定性不太理想。