p38MAPK信號通路參與雌二醇減輕皮瓣缺血再灌注損傷機(jī)制的初步研究.pdf

1、目的：p38絲裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）信號通路是哺乳動物細(xì)胞中調(diào)控炎癥、細(xì)胞增殖與凋亡等最重要的信號通路之一。p38MAPK在細(xì)胞內(nèi)可被周圍環(huán)境中的應(yīng)激刺激、炎性因子等激活，在缺血再灌注損傷的發(fā)生和發(fā)展過程中起到非常重要的作用。本文旨在通過探討雌二醇（Estradiol，E2）對皮瓣內(nèi)p38MAPK信號通路的影響及p38MAPK信號通路在皮瓣缺血再灌注損傷中的作用，為雌二醇治療皮瓣缺血再灌注損傷提供理論依據(jù)。
　　方法：

2、Wistar大鼠48只，雄性，12~14周，在無特定病原菌級（SPF級）實驗室條件下，建立大鼠腹部皮瓣缺血再灌注損傷模型。隨機(jī)將大鼠分為對照組（Ⅰ組）：皮瓣切取后不作缺血再灌注處理，即刻原位縫合皮瓣；缺血再灌注組（Ⅱ組）：切取皮瓣后，用無損傷顯微血管夾夾閉腹壁淺動靜脈6h后取出血管夾，確認(rèn)腹壁淺動靜脈血流恢復(fù)后，同法縫合皮瓣；生理鹽水組（Ⅲ組）：同Ⅱ組建立皮瓣模型后，腹腔注射生理鹽水；E2組（Ⅳ組）：同Ⅱ組建立皮瓣模型，腹腔注射E2。術(shù)

3、后觀察各組皮瓣一般情況；對皮瓣進(jìn)行攝像，采用Image-Pro Plus.V6.0圖像分析系統(tǒng)計算皮瓣存活率；抽取皮瓣蒂部腹壁淺靜脈血，檢測血清中性粒細(xì)胞（neutrophils，NEU）數(shù)量、TNF-α及IL-10濃度；切取皮瓣行組織學(xué)觀察，應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色及Western Blot法檢測p38 MAPK及絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-2（MKP-2）的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：術(shù)后7d，大鼠皮瓣存活率Ⅳ組顯著高于Ⅱ、Ⅲ組（P<0.

4、05）。Ⅳ組蒂部靜脈血NEU數(shù)量及TNF-α濃度明顯低于Ⅱ、Ⅲ組（P<0.05），而IL-10濃度顯著高于Ⅱ、Ⅲ組（P<0.05）。皮瓣組織學(xué)與超微結(jié)構(gòu)檢查結(jié)果顯示：與Ⅱ組、Ⅲ組相比，Ⅳ組皮瓣炎性滲出明顯較少，組織結(jié)構(gòu)完整，細(xì)胞變性、壞死現(xiàn)象少見，細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器更加完整。Western Blot結(jié)果與免疫組化結(jié)果一致，顯示：Ⅱ、Ⅲ組p38MAPK表達(dá)明顯高于Ⅰ組（P<0.05），而Ⅳ組p38MAPK表達(dá)較Ⅱ、Ⅲ組顯著降低(P<0.05)。

5、Ⅳ組MKP-2表達(dá)較Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組均顯著增加(P<0.05)。相關(guān)性結(jié)果顯示：皮瓣存活率與NEU數(shù)量、TNF-α濃度之間均顯著負(fù)相關(guān)。
　　結(jié)論：1.雌二醇可明顯抑制皮瓣內(nèi)NEU介導(dǎo)的炎癥級聯(lián)反應(yīng)，減少TNF-α等促炎介質(zhì)釋放，增強(qiáng)組織抗炎功能，保護(hù)皮瓣內(nèi)微循環(huán)血流灌注，從而減輕皮瓣缺血再灌注損傷引起的病理生理變化，增強(qiáng)皮瓣活力，促進(jìn)皮瓣存活。為雌二醇治療皮瓣缺血再灌注損傷提供了新的證據(jù)和方向。
　　2.雌二醇可顯著抑制皮瓣組