芍藥苷對大鼠腦缺血再灌注損傷神經(jīng)細胞凋亡及p38MAPK的影響.pdf

1、目的:研究芍藥苷對腦缺血再灌注損傷的保護作用，探討其對缺血區(qū)神經(jīng)細胞凋亡及p38MAPK的影響，拓展該藥的研究和應用范圍，為其臨床預防和治療腦血管疾病提供實驗基礎和理論依據(jù)。
　　方法:通過線栓法建立大鼠大腦中動脈栓塞（MCAO）模型模擬局灶性腦缺血再灌注損傷。將健康SD大鼠隨機分為:假手術組、模型組、尼莫地平組、芍藥苷組、SB203580組、SB203580+芍藥苷組。大鼠于MCAO前半小時腹腔注射生理鹽水或藥物，缺血1.5小時

2、再灌注24小時。用神經(jīng)行為學評分評價大鼠腦缺血再灌注后行為障礙，用2，3，5一三苯基氯化四氮唑(TTC)染色法測定梗死灶體積，用脫氧核糖核酸末端轉移酶介導的原位缺口末端標記法(TUNEL)檢測神經(jīng)細胞凋亡。用Western blotting法及免疫組化法檢測p-p38， iNOS以及Fas和TNF-α的表達改變。
　　結果:1.神經(jīng)行為學評分:各用藥組再灌注24h時神經(jīng)功能缺損情況明顯輕于缺血再灌注組，神經(jīng)功能缺失癥狀改善，缺血再

3、灌注組與各用藥組比較經(jīng)統(tǒng)計學分析有顯著性差異，有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。2.再灌注24hTTC染色，各用藥組能顯著縮小 MCAO大鼠的梗死體積，降低梗塞率，減輕神經(jīng)細胞損傷程度，改善腦功能。3.TUNEL法檢測結果：假手術組腦組織中可見個別散在凋亡細胞，缺血再灌注組可見較多散在凋亡細胞，TUNEL染色陽性；各用藥組陽性細胞較缺血再灌注組明顯減少，其中SB203580+芍藥苷組與其它用藥組相比有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。4．免疫組化

4、法觀察FAS和TNF-α蛋白的表達：與假手術組相比，缺血再灌注組大鼠缺血側腦組織 FAS和 TNF-α蛋白的表達增多(P<0.01)。與缺血再灌注組比較，其余五組大鼠在藥物作用下，發(fā)生腦缺血再灌注后的FAS、TNF-α蛋白表達均有明顯差異（P<0.01）。芍藥苷對大鼠腦缺血再灌注后腦組織FAS、TNF-α蛋白的表達均有下調作用。5．蛋白免疫印跡分析：大鼠腦缺血再灌注后腦組織磷酸化p38蛋白和iNOS蛋白表達明顯增加，注射芍藥苷和SB20