抑制HIF-1α與激活Wnt信號(hào)通路對(duì)早產(chǎn)兒腦損傷近期、遠(yuǎn)期影響初步探討.pdf

1、目的:未成熟腦白質(zhì)損傷(white matter damage，WMD)是早產(chǎn)兒缺氧缺血性腦損傷，對(duì)其保護(hù)的研究一直是新生兒學(xué)科關(guān)注熱點(diǎn)。該實(shí)驗(yàn)通過構(gòu)建早產(chǎn)兒WMD動(dòng)物模型，探討抑制HIF-1α、激活Wnt信號(hào)通路對(duì)早產(chǎn)兒腦損傷是否有保護(hù)作用，為臨床干預(yù)治療早產(chǎn)兒腦損傷提供新思路。
　　方法:取三日齡(postnatal day3，P3)SD大鼠，隨機(jī)分為WMD、WMD+PHI、WMD+PHI+Wnt激動(dòng)劑、WMD+PHI+XAV

2、939組，建立WMD模型，于造模24h后，利用腦室定位儀，根據(jù)實(shí)驗(yàn)分組分別干預(yù)。通過組織免疫熒光的方法，對(duì)OPC進(jìn)行O1單標(biāo)，OL進(jìn)行O4單標(biāo)，分別觀察各組新生大鼠術(shù)后1d、3d、7d、14d腦組織中OPC及OL的數(shù)量改變。利用Western blot技術(shù)測定各組新生大鼠術(shù)后1d、3d、7d、14d腦組織中HIF-1α蛋白表達(dá)情況。通過RT-qPCR技術(shù)檢測各組新生大鼠術(shù)后1d、3d、7d、14d腦組織中HIF-1α及Wnt7a的mRN

3、A水平。應(yīng)用懸吊實(shí)驗(yàn)、曠場實(shí)驗(yàn)、避暗實(shí)驗(yàn)對(duì)各組大鼠于術(shù)后28d進(jìn)行神經(jīng)運(yùn)動(dòng)、認(rèn)知、記憶能力檢測，觀察各組大鼠行為學(xué)情況。
　　結(jié)果:WMD組OPC、OL數(shù)量最少，而在造模后聯(lián)合應(yīng)用PHI(HIF-1α抑制劑)、Wnt激動(dòng)劑組中OPC、OL數(shù)量較其余三組均明顯增多。HIF-1α在1d、3d、7d、14d各時(shí)間點(diǎn)中，WMD組含量最少，而在聯(lián)合應(yīng)用PHI+Wnt激動(dòng)劑組中含量最高，與免疫熒光中OPC趨勢(shì)一致。RT-qPCR結(jié)果與免疫熒光

4、、Western blot結(jié)果一致，HIF-1α與Wnt7a的表達(dá)量呈正相關(guān)(r=0.765，p＜0.05)。行為學(xué)實(shí)驗(yàn)提示:各組大鼠在肌力運(yùn)動(dòng)方面無差別，PHI的應(yīng)用對(duì)大鼠情感認(rèn)知和記憶能力方面有部分修復(fù)保護(hù)作用，其中聯(lián)合應(yīng)用Wnt激動(dòng)劑后效果更佳。
　　結(jié)論:3日齡未成熟大鼠腦白質(zhì)損傷后通過HIF-1α抑制劑PHI和Wnt激動(dòng)劑聯(lián)合應(yīng)用后，可有效減少由缺氧所致的OPCs損傷及丟失、同時(shí)促進(jìn)OPCs的增殖;當(dāng)機(jī)體缺氧狀態(tài)改善后，