抑制HIF-1α與激活Wnt信號通路對早產(chǎn)兒腦損傷近期、遠期影響初步探討.pdf

1、目的:未成熟腦白質(zhì)損傷(white matter damage，WMD)是早產(chǎn)兒缺氧缺血性腦損傷，對其保護的研究一直是新生兒學科關注熱點。該實驗通過構(gòu)建早產(chǎn)兒WMD動物模型，探討抑制HIF-1α、激活Wnt信號通路對早產(chǎn)兒腦損傷是否有保護作用，為臨床干預治療早產(chǎn)兒腦損傷提供新思路。
　　方法:取三日齡(postnatal day3，P3)SD大鼠，隨機分為WMD、WMD+PHI、WMD+PHI+Wnt激動劑、WMD+PHI+XAV

2、939組，建立WMD模型，于造模24h后，利用腦室定位儀，根據(jù)實驗分組分別干預。通過組織免疫熒光的方法，對OPC進行O1單標，OL進行O4單標，分別觀察各組新生大鼠術(shù)后1d、3d、7d、14d腦組織中OPC及OL的數(shù)量改變。利用Western blot技術(shù)測定各組新生大鼠術(shù)后1d、3d、7d、14d腦組織中HIF-1α蛋白表達情況。通過RT-qPCR技術(shù)檢測各組新生大鼠術(shù)后1d、3d、7d、14d腦組織中HIF-1α及Wnt7a的mRN

3、A水平。應用懸吊實驗、曠場實驗、避暗實驗對各組大鼠于術(shù)后28d進行神經(jīng)運動、認知、記憶能力檢測，觀察各組大鼠行為學情況。
　　結(jié)果:WMD組OPC、OL數(shù)量最少，而在造模后聯(lián)合應用PHI(HIF-1α抑制劑)、Wnt激動劑組中OPC、OL數(shù)量較其余三組均明顯增多。HIF-1α在1d、3d、7d、14d各時間點中，WMD組含量最少，而在聯(lián)合應用PHI+Wnt激動劑組中含量最高，與免疫熒光中OPC趨勢一致。RT-qPCR結(jié)果與免疫熒光

4、、Western blot結(jié)果一致，HIF-1α與Wnt7a的表達量呈正相關(r=0.765，p＜0.05)。行為學實驗提示:各組大鼠在肌力運動方面無差別，PHI的應用對大鼠情感認知和記憶能力方面有部分修復保護作用，其中聯(lián)合應用Wnt激動劑后效果更佳。
　　結(jié)論:3日齡未成熟大鼠腦白質(zhì)損傷后通過HIF-1α抑制劑PHI和Wnt激動劑聯(lián)合應用后，可有效減少由缺氧所致的OPCs損傷及丟失、同時促進OPCs的增殖;當機體缺氧狀態(tài)改善后，