HIF-1α經(jīng)β-catenin激活WNT通路對(duì)缺氧胃癌細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、目的:探討缺氧環(huán)境下缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)、β-連環(huán)蛋白(β-catenin)與Wnt信號(hào)通路之間的關(guān)系及胰島素樣生長(zhǎng)因子Ⅱ mRNA結(jié)合蛋白3(IMP3)和增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)在胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖中的作用。
　　方法:使用RNAi技術(shù)，建立靶向干擾β-catenin的質(zhì)粒。將pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR-β-catenin質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至人胃癌細(xì)胞株SGC-7091，建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株mi

2、R-β-catenin-7901。實(shí)驗(yàn)分成對(duì)照組、缺氧組、干擾組和缺氧干擾組，采用平板克隆形成實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞倍增時(shí)間檢測(cè)各組SGC-7901細(xì)胞的增殖情況，蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)各組SGC-7901細(xì)胞中HIF-1α、β-catenin、IMP3和PCNA蛋白的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:與對(duì)照組比較，缺氧組細(xì)胞的平板克隆形成數(shù)增多、倍增時(shí)間縮短(P＜0.05);與缺氧組比較，缺氧干擾組細(xì)胞平板克隆形成數(shù)減少、倍增時(shí)間延長(zhǎng)(P＜0.05)。缺氧組

3、細(xì)胞中HIF-1α、β-連環(huán)蛋白、IMP3和PCNA蛋白表達(dá)水平均高于對(duì)照組(P＜0.05);干擾組細(xì)胞中HIF-1α、β-catenin、IMP3和PCNA蛋白表達(dá)水平低于對(duì)照組(P＜0.05);缺氧干擾組細(xì)胞中HIF-1α、β-catenin、IMP3和PCNA蛋白表達(dá)水平低于缺氧組(P＜0.05)。
　　結(jié)論:1）靶向干擾β-catenin的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株miR-β-catenin-7901建立成功。2）缺氧條件下，胃癌細(xì)胞