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文檔簡介
1、瘢痕是創(chuàng)面過度愈合的結果,也是人類特有的纖維化代謝性疾病,發(fā)病機制尚未明確。增生性瘢痕(HTS)不僅影響患者美觀,還會引起不同程度肢體功能障礙,是臨床亟待解決的難題之一。隨著對間充質干細胞(MSCs)的認識和發(fā)展,采用MSCs作為治療瘢痕創(chuàng)面的細胞療法,已經(jīng)成為新的研究熱點。目前骨髓間充質干細胞用于促進動物創(chuàng)面愈合的研究較多,但其對瘢痕創(chuàng)面的治療效果尚存在爭議。本組研究以及國內(nèi)外學者的新近研究表明,增生性瘢痕的形成與干細胞及其微環(huán)境有關
2、,因此應用干細胞直接修復創(chuàng)面過度愈合的手段及其機制值得進一步深入探討。增生性瘢痕形成過程中的微環(huán)境促使成纖維細胞發(fā)生異質性變化,我們推測不同時期成纖維細胞的這種變化也在一定程度上反映著增生性瘢痕發(fā)生發(fā)展過程中微環(huán)境的變化情況。本課題旨在探討瘢痕形成過程中成纖維細胞的變化,并以此作為不同微環(huán)境來培養(yǎng)骨髓間充質干細胞,探討微環(huán)境對骨髓間充質干細胞分泌功能的影響,待篩選出關鍵蛋白后,再應用基因敲除技術來驗證不同微環(huán)境下人骨髓間充質干細胞對成纖
3、維細胞的作用和對創(chuàng)面愈合的影響,以期望能夠從正向和逆向的角度分別揭示骨髓間充質干細胞在創(chuàng)面正常愈合或瘢痕愈合中的作用。
主要結果和結論:
1.一般體外培養(yǎng)的人正常皮膚成纖維細胞與增生性瘢痕成纖維細胞從形態(tài)結構、生長增殖等方面無明顯差異。
2.采用條件培養(yǎng)基模擬增生性瘢痕及正常皮膚微環(huán)境重復性好,操作簡便因而具有可行性。
3.人正常皮膚成纖維細胞在經(jīng)瘢痕形成條件培養(yǎng)基作用后植入裸鼠皮下能夠形成瘢痕瘤
4、狀物,而在正常條件培養(yǎng)基作用下未見瘢痕形成,進一步說明瘢痕形成條件培養(yǎng)基的作用及其對成纖維細胞的影響。
4.HBM-MSCs在不同微環(huán)境下分泌的細胞因子存在差異,其中RANTES、IL-6、TNF-α、MIP-1-α及TGF-β3等因子差異性顯著。其中趨化因子RANTES差異性最大,而與纖維化相關的TGF-β1/TGF-β3也存在明顯差異。
5.在共培養(yǎng)條件下,HBM-MSCs對在瘢痕形成微環(huán)境作用下的威纖維細胞的增
5、殖及膠原合成是促進作用,而同樣條件下用RANTES siRNA的HBM-MSCs對成纖維細胞的增殖及膠原合成促進作用明顯降低,降低了其瘢痕形成的可能性。
成纖維細胞在瘢痕形成微環(huán)境下會向瘢痕愈合轉歸,說明成纖維細胞的變化也在一定程度上受創(chuàng)面愈合微環(huán)境的影響。HBM-MSCs隨著創(chuàng)面愈合微環(huán)境變化其分泌功能發(fā)生改變,在瘢痕愈合的微環(huán)境下HBM-MSCs會加重瘢痕愈合。趨化因子RANTES在創(chuàng)面愈合中HBM-MSCs對于成纖維細胞
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