紅景天苷通過抑制內(nèi)質網(wǎng)應激減少高同型半胱氨酸誘導的人臍靜脈內(nèi)皮細胞的損傷.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:研究紅景天苷對高同型半胱氨酸誘導的內(nèi)皮細胞損傷的保護作用及其機制。
  方法:實驗一部分:使用不同濃度(0.25 mmol/L、0.5 mmol/L、1 mmol/L、2 mmol/L、
  4 mmol/L)同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)刺激人臍靜脈內(nèi)皮細胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs),處理24小時后,使用MTT法檢測HUVECs生

2、存率。實時熒光定量PCR法(Realtime PCR,rtPCR)檢測免疫球蛋白重鏈結合蛋白(binding immunoglobulin protein,Bip)和C/EBP同源蛋白(transcriptional factor C/EBP homologous protein,CHOP)的基因轉錄水平。Western blot法檢測Bip、CHOP蛋白表達水平,PKR內(nèi)質網(wǎng)激酶(protein kinase RNA(PKR)-lik

3、e ER kinase,PERK)、內(nèi)質網(wǎng)核信號轉導蛋白1α(inositol-requiring protein-1α,IRE1α)、磷酸化水平。
  實驗二部分:預先使用不同濃度的紅景天苷(Salidroside,Sal)(3μmol/L、30μmol/L、300μmol/L)預處理HUVECs2小時,再根據(jù)實驗一的結果,挑選出合適濃度的Hcy(1mmol/L),加入HUVECs中共同培養(yǎng)一段時間。使用實驗一介紹方法檢測各指標

4、。
  結果: Hcy組細胞生存率低于空白對照組(P<0.05),Bip和CHOP的基因表達量和蛋白表達量顯著升高(P<0.05),PERK和 IRE1α的磷酸化水平在較短時間內(nèi)升高(P<0.05)。高濃度紅景天苷(300μmol/L)與Hcy共同作用組的細胞生存率顯著高于僅有Hcy刺激的實驗對照組(P<0.05),并且Bip和CHOP的基因表達和蛋白表達均下降(P<0.05),PERK和 IRE1α的磷酸化水平均下調(diào)(P<0.0

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