紅景天苷通過抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激減少高同型半胱氨酸誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的損傷.pdf

1、目的：研究紅景天苷對高同型半胱氨酸誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制。
　　方法：實(shí)驗(yàn)一部分：使用不同濃度（0.25 mmol/L、0.5 mmol/L、1 mmol/L、2 mmol/L、
　　4 mmol/L）同型半胱氨酸（Homocysteine，Hcy）刺激人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（human umbilical vein endothelial cells, HUVECs），處理24小時后，使用MTT法檢測HUVECs生

2、存率。實(shí)時熒光定量PCR法（Realtime PCR，rtPCR）檢測免疫球蛋白重鏈結(jié)合蛋白（binding immunoglobulin protein，Bip）和C/EBP同源蛋白（transcriptional factor C/EBP homologous protein，CHOP）的基因轉(zhuǎn)錄水平。Western blot法檢測Bip、CHOP蛋白表達(dá)水平，PKR內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶（protein kinase RNA(PKR)-lik

3、e ER kinase，PERK）、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白1α（inositol-requiring protein-1α，IRE1α）、磷酸化水平。
　　實(shí)驗(yàn)二部分：預(yù)先使用不同濃度的紅景天苷（Salidroside，Sal）（3μmol/L、30μmol/L、300μmol/L）預(yù)處理HUVECs2小時，再根據(jù)實(shí)驗(yàn)一的結(jié)果，挑選出合適濃度的Hcy（1mmol/L），加入HUVECs中共同培養(yǎng)一段時間。使用實(shí)驗(yàn)一介紹方法檢測各指標(biāo)

4、。
　　結(jié)果： Hcy組細(xì)胞生存率低于空白對照組（P<0.05），Bip和CHOP的基因表達(dá)量和蛋白表達(dá)量顯著升高（P<0.05），PERK和 IRE1α的磷酸化水平在較短時間內(nèi)升高（P<0.05）。高濃度紅景天苷（300μmol/L）與Hcy共同作用組的細(xì)胞生存率顯著高于僅有Hcy刺激的實(shí)驗(yàn)對照組（P<0.05），并且Bip和CHOP的基因表達(dá)和蛋白表達(dá)均下降（P<0.05），PERK和 IRE1α的磷酸化水平均下調(diào)（P<0.0