艾司西酞普蘭對MPTP誘導(dǎo)急性帕金森小鼠模型的運(yùn)動和認(rèn)知功能的影響.pdf

1、目的：帕金森?。≒arkinson's disease，PD）是常發(fā)于中老年人的中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，主要臨床表現(xiàn)為震顫、強(qiáng)直、運(yùn)動弛緩、姿勢平衡障礙等運(yùn)動癥狀，此外，常伴發(fā)抑郁、焦慮、便秘、睡眠障礙、認(rèn)知功能減退等非運(yùn)動癥狀。艾司西酞普蘭（escitalopram，ESC）是新型的高選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑（Selective Serotonin Reuptake Inhibitor，SSRI），對受體的選擇性較高，對肝藥酶P45

2、0的抑制作用小，不良反應(yīng)及藥物相關(guān)反應(yīng)也較少，安全性較高，在臨床廣泛應(yīng)用于廣泛性焦慮、抑郁癥。本文旨在探討ESC對PD小鼠模型運(yùn)動、認(rèn)知功能的影響。
　　方法：將37只11周齡23~30g C57BL/6J健康雄性小鼠隨機(jī)分為3組：
　　1.正常對照組（CON組）：正常健康小鼠，腹腔注射0.1ml生理鹽水；
　　2.急性PD組（PD組）：采用急性腹腔注射MPTP制作急性PD模型小鼠，20mg/kg MPTP腹腔注射，每

3、2h注射1次，共4次；
　　3.ESC預(yù)處理組：在制備PD模型前3天，每日對小鼠進(jìn)行10mg/kgESC腹腔注射，每天1次，共3天；
　　以MPTP制備PD模型為第0天，第-3至-1天進(jìn)行爬桿實(shí)驗(yàn)適應(yīng)性訓(xùn)練及ESC預(yù)處理，第2-7天進(jìn)行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)，第8天進(jìn)行爬桿實(shí)驗(yàn)，第9天按照預(yù)定條件取各組小鼠大腦，采用Western blot觀察小鼠大腦海馬BDNF的變化，采用免疫組織化學(xué)觀察小鼠海馬細(xì)胞個(gè)數(shù)變化，以及觀察黑質(zhì)

4、-紋狀體酪氨酸羥化酶陽性（tyrosine hydroxylase positive， TH+）細(xì)胞的改變。
　　結(jié)果：
　　1.黑質(zhì)及紋狀體TH+細(xì)胞的改變
　　第15d小鼠黑質(zhì)行TH免疫組織化學(xué)染色，結(jié)果顯示：PD組小鼠黑質(zhì)的殘留TH+細(xì)胞皺縮，不飽滿，有梭形改變，突起減少。PD組與CON組相比，黑質(zhì)TH+細(xì)胞數(shù)較正常下降49.31％， ESC預(yù)處理組與CON組相比，黑質(zhì)TH+細(xì)胞數(shù)較正常下降32.35%。差異均有

5、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05）。PD組與 CON組相比，PD組紋狀體 TH+細(xì)胞的平均光密度（mean optical density，MOD）較CON組下降了69.55%，ESC預(yù)處理組較CON組下降了51.46%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　2.ESC對PD模型小鼠認(rèn)知功能影響
　　2.1.ESC對PD模型小鼠學(xué)習(xí)功能的影響
　　PD模型造模成功后，在第2天進(jìn)行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)測試各組小鼠的學(xué)習(xí)功能。

6、通過對定向航行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行重復(fù)測量檢驗(yàn)，各組小鼠的潛伏期均逐漸縮短（CON組=ESC組0.05）， PD組與ESC組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），CON組和ESC組較PD組潛伏期明顯縮短。
　　2.2.ESC對PD模型小鼠記憶功能的影響
　　通過第6天水迷宮檢測，CON組小鼠與PD組小鼠穿過平臺次數(shù)及穿越平臺路程比

7、率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），CON組與ESC預(yù)處理組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），ESC預(yù)處理組有穿越平臺次數(shù)增加及穿越平臺路程比率升高但與PD組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。小鼠的記憶狀況為CON組≥ESC組≥PD組，且CON組>PD組，說明PD小鼠的記憶能力明顯下降，ESC預(yù)處理組的記憶能力在一定程度上有所改善，但是尚不能與PD組有明顯區(qū)別。
　　3.ESC對PD模型小鼠海馬區(qū)BDNF含量的影響
　　通過

8、Western blot檢測各組小鼠海馬區(qū)BDNF含量，結(jié)果顯示PD組（0.09±0.01）BDNF含量明顯低于CON組（0.64±0.27）及ESC預(yù)處理組（0.57±0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），而CON組與ESC預(yù)處理組無差異（P>0.05）。
　　4.ESC對PD模型小鼠海馬區(qū)細(xì)胞個(gè)數(shù)的影響
　　小鼠海馬區(qū)細(xì)胞經(jīng)免疫組化膽堿能染色后，結(jié)果顯示CON組細(xì)胞數(shù)（100.9±10.8）個(gè)與PD組小鼠（84±

9、7.0）個(gè)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）， CON組與ESC預(yù)處理組（94.8±7.6）個(gè)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），PD組與ESC預(yù)處理組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），CON組和ESC組平均海馬細(xì)胞個(gè)數(shù)明顯高于PD組。
　　5.ESC對PD模型小鼠運(yùn)動功能的影響
　　在第7d進(jìn)行的Morris水迷宮試驗(yàn)檢測各組小鼠游泳速度，結(jié)果顯示：PD組與CON組、ESC預(yù)處理組相比游泳速度顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0

10、.05），CON組與ESC預(yù)處理組間的游泳速度相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　在MPTP造模第8d進(jìn)行爬桿實(shí)驗(yàn)，檢測各組小鼠的運(yùn)動功能。結(jié)果顯示：CON組與PD組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），CON組與ESC預(yù)處理組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），PD組與ESC組有差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），CON組與ESC預(yù)處理組小鼠的爬桿時(shí)間明顯低于PD組。
　　結(jié)論：
　　1.急性腹腔注射MPTP可以成

11、功制作PD模型，在PD模型制作初期運(yùn)動能力損傷嚴(yán)重，PD小鼠的震顫、強(qiáng)直癥狀明顯，24h后，癥狀逐漸減輕至消失。MPTP對C57BL/6J小鼠的黑質(zhì)-紋狀體多巴胺能神經(jīng)元和神經(jīng)纖維造成了嚴(yán)重?fù)p害。
　　2.MPTP對C57BL/6J小鼠的學(xué)習(xí)及記憶能力有損害，認(rèn)知功能明顯下降。ESC可以改善急性PD小鼠的學(xué)習(xí)能力，但對MPTP造成的記憶損害無明顯改善；ESC預(yù)處理可以緩解急性PD小鼠的運(yùn)動功能障礙。
　　3.ESC預(yù)處理對P