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文檔簡介
1、目的:1、研究 miR-29a對 PC12細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的影響,為進(jìn)一步探究miR-29a生物學(xué)作用奠定基礎(chǔ);2、探明 miR-29a調(diào)控 PTEN表達(dá),激活 PTEN下游Akt通路。
方法:1、以PC12細(xì)胞為研究對象,建立并篩選出高表達(dá) miR-29a細(xì)胞株(PC12-pLKO-miR-29a),以高表達(dá)pLKO.1-puro-vector空載的細(xì)胞(PC12-pLKO-vector)作為對照;2、通過點(diǎn)突變及雙熒光報
2、告基因明確 miR-29a作用于 PTEN的mRNA位點(diǎn);3、通過RT-PCR、細(xì)胞免疫熒光、Western blot觀察miR-29a對PC12細(xì)胞軸突的影響。
結(jié)果:1、miR-29a能夠作用于 PTEN的3′UTRs區(qū),并特異性地降低PTEN的表達(dá)量;2、miR-29a能夠激活PTEN/Akt通路促進(jìn)PC12細(xì)胞軸突伸長。
結(jié)論:本研究初步證實(shí)miR-29a能夠促進(jìn)PC12細(xì)胞分化,軸突伸長,該過程同miR-2
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