耐力訓練對兔心房肌細胞IK1及IKAch的影響及在運動相關(guān)心房顫動發(fā)病機制中的作用.pdf

1、目的：
　　心房顫動（房顫）為臨床上最常見的快速型心律失常之一。長時間、高強度的耐力訓練可增加房顫的發(fā)生率。但目前對耐力訓練導致心房電重構(gòu)的機制所知極少。接受耐力訓練者可出現(xiàn)心房增大、迷走神經(jīng)張力增高，我們提出耐力訓練導致IK1和IKAch的功能改變與房顫的發(fā)生有關(guān)。并從四個方面進行驗證：1.建立不同強度的耐力訓練觀察心房形態(tài)學及心率的改變；2.對離體整體心臟分別應用IK1及IKAch激動劑和阻斷劑前后比較房顫誘發(fā)閾值及相關(guān)電生理

2、參數(shù)的變化；3.應用全細胞膜片鉗技術(shù)測定IK1、IKAch功能的變化程度，明確以上兩個通道在運動耐力相關(guān)的房顫發(fā)生中的作用；4.進而測定編碼IK1及IKAch基因mRNA的變化，明確離子流變化的分子生物學基礎(chǔ)。綜合以上結(jié)果，以期探尋出接受耐力訓練者易患房顫的電生理機制，篩選防治藥物。
　　方法：
　　42只健康成年新西蘭大耳白兔，隨機分為對照組（n=14）、中強度組（n=14）、高強度組（n=14），對照組不進行任何訓練，中

3、強度組和高強度組在兔實驗跑臺下進行不同強度運動，每天1小時或一次性力竭（不足1小時），每周5天，持續(xù)12周（第一周為適應性訓練）。每組8只實驗兔，于運動前、運動后8周、12周通過超聲心動圖檢測各組兔心房大小、測定固有心率（IHR）及基礎(chǔ)心率；造模成功后即運動結(jié)束后，在全麻下取出實驗兔心臟，采用離體心臟Langendorff系統(tǒng)進行灌流，采用乙酰膽堿誘發(fā)的房顫模型，給予不同濃度的氯化鋇（IK1抑制劑）、阿托品（IKAch抑制劑），分別記錄

4、相應的90％動作電位時程、心房有效不應期等電生理參數(shù)，行心房早搏程序刺激（S1S2）誘發(fā)房顫，并觀察房顫的誘發(fā)率。灌流完后剪取實驗兔左、右心房，經(jīng)液氮固定并保存后行PT-PCR檢測，以左、右房心肌組織分別觀察各組IK1通道Kir2.1、Kir2.2及IKAch通道Kir3.1、Kir3.4的基因表達。其余每組6只實驗兔，分離左、右心房肌細胞采用全細胞膜片鉗技術(shù)，觀察各組實驗兔IK1、IKAch電流密度的差別。
　　結(jié)果：
　

5、　（1）模型的建立：與對照組比較，中強度組和高強度組左、右房前后徑在運動訓練8周后均增加，12周后也增加，差異有統(tǒng)計學意義（P均＜0.05）。與中強度組比較，高強度組左、右房前后徑在運動訓練8周后均增加，12周后也增加，差異有統(tǒng)計學意義（P均＜0.05）。與對照組比較，中強度組（45%vs.60%）和高強度組（45%vs.90%）房顫發(fā)生率增加，差異有顯著統(tǒng)計學意義（P均＜0.01）。
　?。?）心率：運動前后對照組兔靜息心率、I

6、HR和心臟離體心率未發(fā)生顯著性變化（P?0.05），中、高強度組運動后兔靜息心率、IHR及心臟離體心率較運動前顯著降低（P<0.05）。
　　（3）電生理特性及房顫誘發(fā)率：在Ach作用下房顫誘發(fā)率高強度組明顯高與中強度組和對照組（均P<0.05）。各組實驗兔，在Ach+不同濃度的阿托品和Ach+不同濃度B aCL2作用下，兔心房肌ADP90和AERP較Ach單獨作用均顯著延長（P<0.05），房顫的誘發(fā)率均顯著降低（P<0.05）

7、，且隨著濃度的增加房顫有誘發(fā)率逐漸降低；其中高強度組兔心房肌ADP90和AERP顯著短于其他兩組（P<0.05），同時房顫誘發(fā)率顯著高于其他兩組（P<0.05）。
　?。?）膜片鉗結(jié)果比較：左房高強度組IKAch電流密度增加（P<0.003，vs對照組及中強度組），中強度組在+50mV時電流密度增大（P=0.001 vs.對照組）；右房高強度組IKAch電流密度增加（P<0.002，vs對照組及中強度組）。
　?。?）分子生

8、物學比較：高強度組較對照組及中強度組：左、右心房組織Kir2.1和Kir2.2的mRNA表達明顯上調(diào)（P<0.05），中強度組較對照組:左房組織Kir2.1的mRNA表達增高（P<0.05）；Kir3.1和Kir3.4的 mRNA表達左、右心房組織高強度組較對照組顯著增高（P<0.04），在左房kir3.1的mRNA的表達中強度組較對照組增高（P=0.01）， kir3.4的mRNA的表達較高強度組明顯高于中強度組。
　　結(jié)論：<