大鼠實驗性矽肺中樹突狀細胞及其相關細胞因子分布規(guī)律.pdf

1、背景和目的:
　　矽肺危害嚴重，然而機制仍不完全清楚，但已知其發(fā)生發(fā)展過程的關鍵環(huán)節(jié)之一是免疫反應。樹突狀細胞（dendritic cell，DC）是已知功能最強的抗原呈遞細胞，且與巨噬細胞有相近、交叉的結構與功能，推測 DC在矽塵識別與攝取、矽肺獲得性免疫應答中很可能也是極其重要的效應細胞。因此建立大鼠實驗性矽肺模型，對不同時間點大鼠肺組織和外周血中DC表面分子MHC-Ⅱ、CD80及其相關細胞因子進行檢測。初步探討其在矽肺發(fā)生發(fā)

2、展過程中的作用及意義，為進一步開展矽肺免疫干預研究提供新思路和理論依據(jù)。
　　方法:
　　1、選用河南省實驗動物中心提供的無特定病原體（Specific pathogen free， SPF）健康成年雄性SD大鼠96只，體重200~250g。將其隨機分為2組：染塵組、對照組。
　　2、采用非氣管暴露法染塵建立大鼠矽肺模型，分別在染塵前、染塵后24h、1周、2周3周、6周、9周、12周處死6只。
　　3、流式細胞術

3、對外周血中DC表面分子MHC-Ⅱ、CD80進行檢測。
　　4、免疫組化法對肺組織中DC表面分子MHC-Ⅱ、CD80進行定位、分布。
　　5、酶聯(lián)免疫吸附測定法（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測肺組織中細胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-18、IL-4和IL-10的表達。
　　6、統(tǒng)計方法：采用Excel2007建立數(shù)據(jù)集，應用SPSS17.0統(tǒng)計軟件對實驗數(shù)據(jù)進行分

4、析，數(shù)據(jù)的統(tǒng)計描述以( X±S)表示，兩組間均數(shù)比較采用t檢驗；Pearson相關進行相關性分析。檢驗水準α=0.05。
　　結果:
　　1、染塵組外周血CD80和MHC-Ⅱ的表達量在染塵后逐漸升高，在2周表達量最高并保持穩(wěn)定。染塵組與對照組外周血CD80、MHC-Ⅱ的表達量在染塵2周后差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；染塵組肺組織CD80表達量在染塵后逐漸增加，在2周表達量最高并保持穩(wěn)定，染塵組與對照組肺組織CD80的表達

5、量在染塵2周后差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。染塵組肺組織 MHC-Ⅱ表達量在染塵后1周到達高峰并保持穩(wěn)定，染塵組與對照組肺組織MHC-Ⅱ在染塵1周后差異有統(tǒng)計學意義。
　　2、染塵后各時間點染塵組TNF-α表達量均高于對照組（P＜0.05）；染塵后24h、1周和2周染塵組IFN-γ表達量高于對照組（P＜0.05）；染塵后1周染塵組中IL-4表達量低于對照組（P＜0.05），染塵后9周及12周高于與對照組（P＜0.05）；染塵后