樹突狀細(xì)胞聯(lián)合細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞體內(nèi)外抗肺癌的實驗效應(yīng)研究.pdf

1、目的：探討樹突狀細(xì)胞(DC)聯(lián)合細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)在體內(nèi)外能否有效的抗肺癌。 方法：正常人外周血單個核細(xì)胞經(jīng)不同細(xì)胞因子作用后培養(yǎng)成DC和CIK細(xì)胞，單個核細(xì)胞經(jīng)貼附塑料平皿獲得單核細(xì)胞，加入GM-CSF，IL-4及TNF-α誘導(dǎo)獲得DC，懸浮細(xì)胞加入IFN-γ，24小時后IL-1α，IL-2及CD3McAb誘導(dǎo)獲得CIK，將A549制備成腫瘤細(xì)胞凍融物，作為腫瘤抗原刺激DC，并將DC與CIK細(xì)胞聯(lián)合培養(yǎng)(DC+C

2、IK，負(fù)載抗原的DC+CIK)，以CIK細(xì)胞單獨培養(yǎng)作為對照。用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞表型，自體混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)和異體混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)檢測其刺激T細(xì)胞的的增殖活性．CytotoxicityTOX96體外殺傷實驗測定體外細(xì)胞毒活性，同時用A549細(xì)胞系建立荷瘤裸鼠模型研究其體內(nèi)抗肺癌活性。 結(jié)果：在培養(yǎng)的第15天，與負(fù)載抗原的DC共同培養(yǎng)的CIK與CIK細(xì)胞單獨培養(yǎng)細(xì)胞相比，增殖速率明顯提高[(23.4±2.3)倍vs(16.7±2.

3、7)倍，P<0.05]，CD<,3><'+>CD<,56><'+>細(xì)胞表達(dá)水平也明顯提高，[(64.3±3.6)％vs(43.9±2.1)％，P<0.05]，同時負(fù)載抗原的DC的CIK對A549細(xì)胞的體外下細(xì)胞毒活性增強(qiáng)，體內(nèi)實驗顯示，與單獨培養(yǎng)的CIK細(xì)胞相比，與負(fù)載抗原的DC共同培養(yǎng)的CIK，可明顯抑制接種瘤細(xì)胞的裸鼠成瘤率,DC+CIK與負(fù)載抗原的DC+CIK在抗六效應(yīng)上沒有明顯差異。 結(jié)論：DC與CIK細(xì)胞共培養(yǎng)后可提高