樹突狀細胞聯(lián)合細胞因子誘導的殺傷細胞體內(nèi)外抗肺癌的實驗效應研究.pdf

1、目的：探討樹突狀細胞(DC)聯(lián)合細胞因子誘導的殺傷細胞(CIK)在體內(nèi)外能否有效的抗肺癌。 方法：正常人外周血單個核細胞經(jīng)不同細胞因子作用后培養(yǎng)成DC和CIK細胞，單個核細胞經(jīng)貼附塑料平皿獲得單核細胞，加入GM-CSF，IL-4及TNF-α誘導獲得DC，懸浮細胞加入IFN-γ，24小時后IL-1α，IL-2及CD3McAb誘導獲得CIK，將A549制備成腫瘤細胞凍融物，作為腫瘤抗原刺激DC，并將DC與CIK細胞聯(lián)合培養(yǎng)(DC+C

2、IK，負載抗原的DC+CIK)，以CIK細胞單獨培養(yǎng)作為對照。用流式細胞儀分析細胞表型，自體混合淋巴細胞反應和異體混合淋巴細胞反應檢測其刺激T細胞的的增殖活性．CytotoxicityTOX96體外殺傷實驗測定體外細胞毒活性，同時用A549細胞系建立荷瘤裸鼠模型研究其體內(nèi)抗肺癌活性。 結果：在培養(yǎng)的第15天，與負載抗原的DC共同培養(yǎng)的CIK與CIK細胞單獨培養(yǎng)細胞相比，增殖速率明顯提高[(23.4±2.3)倍vs(16.7±2.

3、7)倍，P<0.05]，CD<,3><'+>CD<,56><'+>細胞表達水平也明顯提高，[(64.3±3.6)％vs(43.9±2.1)％，P<0.05]，同時負載抗原的DC的CIK對A549細胞的體外下細胞毒活性增強，體內(nèi)實驗顯示，與單獨培養(yǎng)的CIK細胞相比，與負載抗原的DC共同培養(yǎng)的CIK，可明顯抑制接種瘤細胞的裸鼠成瘤率,DC+CIK與負載抗原的DC+CIK在抗六效應上沒有明顯差異。 結論：DC與CIK細胞共培養(yǎng)后可提高