NLRP3信號通路在不同炎癥狀態(tài)下對牙周炎發(fā)生發(fā)展的作用研究.pdf

1、目的：
　　慢性炎癥是一系列慢性疾病，如肥胖、糖尿病等的共同病理機制。肥胖機體以長期的低度慢性系統(tǒng)性炎癥及免疫反應(yīng)異常、胰島素抵抗為重要特征，使其易感于重大代謝疾病包括糖尿病等。肥胖是糖尿病的重要病因，二者呈“孿生”流行趨勢，且均可促進牙周炎的發(fā)展。而關(guān)于NLRP3信號通路在其中所起的關(guān)鍵作用的研究匱乏。本研究目的為探討肥胖及Ⅱ型糖尿病導(dǎo)致的系統(tǒng)性炎癥狀態(tài)對牙周組織炎癥的影響及NLRP3信號通路在其中所起的關(guān)鍵作用。
　　方

2、法：
　　(1)飲食誘導(dǎo)16周牙周結(jié)扎10天建立肥胖小鼠牙周炎模型，記為正常飲食組、正常飲食結(jié)扎組、高脂飲食組、高脂飲食結(jié)扎組。
　　(2)體內(nèi)通過RT-PCR和IHC的方法檢測小鼠牙齦組織內(nèi)NLRP3信號通路(NLRP3，capase1，IL-1β，NFκb)及巨噬細胞表面標(biāo)記物F4/80、巨噬細胞趨化因子MCP1的表達情況。
　　(3)體外分離培養(yǎng)不同飲食背景的小鼠BMDMs并對其進行LPS刺激，通過RT-PCR及

3、ICC檢測巨噬細胞內(nèi)NLRP3信號通路的表達。
　　(4)收集人類健康組、慢性牙周炎組及慢性牙周炎伴Ⅱ型糖尿病組患者牙齦組織，體內(nèi)通過RT-PCR及IHC檢測牙齦組織內(nèi)NLRP3信號通路的表達。體外分離培養(yǎng)人牙齦上皮細胞并對其進行高糖及LPS刺激實驗，通過RT-PCR及ICC檢測上皮細胞內(nèi)NLRP3信號通路的表達。
　　結(jié)果：
　　(1)高脂飼料誘導(dǎo)16w小鼠的體重及血糖明顯高于正常飼料組。小鼠牙槽骨吸收:牙周炎組顯著

4、高于非牙周炎組，高脂飲食組顯著高于正常飲食組。血清胰島素及炎癥因子TNF-α，IL-1β，IL-6，IL-10表達水平:高脂飲食組顯著高于正常飲食組。
　　(2)小鼠牙齦組織中NLRP3，Caspase1，IL-1β及NFκb的mRNA及蛋白質(zhì)表達水平:牙周炎組顯著高于非牙周炎組。
　　(3)小鼠牙齦組織中F4/80及MCP1的mRNA及蛋白質(zhì)表達水平:牙周炎組顯著高于非牙周炎組，高脂飲食組顯著低于正常飲食組。BMDMs中N

5、LRP3信號通路因子的mRNA及蛋白質(zhì)表達水平:LPS刺激組顯著高于非刺激組，高脂飲食組顯著低于正常飲食組。
　　(4)人牙齦組織中NLRP3信號通路因子的mRNA及蛋白質(zhì)表達水平:在伴有炎癥及Ⅱ型糖尿病的牙齦組織中表達顯著性升高。HGECs中NLRP3信號通路因子的mRNA及蛋白質(zhì)表達水平在高糖刺激后顯著升高。
　　結(jié)論：
　　發(fā)現(xiàn)，肥胖、Ⅱ型糖尿病的機體處于慢性炎癥狀態(tài)均加重了牙周炎的發(fā)生發(fā)展。肥胖導(dǎo)致感染的牙周組