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文檔簡介
1、目的:探討LKBl/STKll(Liver kinase B1/Serine-Threonine Kinase II)基因沉默對前列腺癌細胞株PC-3中增殖相關因子細胞周期素D1( cyclinD1)、微小染色體維持缺陷蛋白2( Mini chromosome maintenance protein2, Mcm2)和增殖細胞核抗原(ProliferatingCellNuclearAntigen,PCNA)表達的影響及其可能機制。
2、 方法:將重組表達質粒LKB1-shRNA1(LKB1-shRNA1組)和陰性對照質粒shNC(陰性對照組)采用脂質體介導法轉染至前列腺癌細胞株PC-3中,并設未轉染組,經(jīng)G418篩選出穩(wěn)定轉染細胞,RT-PCR法檢測轉染前后細胞中LKB1、cyclinD1、Mcm2和PCNA基因mRNA的轉錄水平;Western blot法檢測轉染前后細胞中LKB1、cyclinD1、Mcm2和PCNA蛋白表達水平;CCK-8法檢測轉染后細胞的增殖
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