表沒食子兒茶素沒食子酸酯對附睪脂肪組織巨噬細胞極化的影響.pdf

1、肥胖是一種與代謝相關的全身慢性輕度炎癥，與胰島素抵抗、Ⅱ型糖尿病等疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關。在肥胖發(fā)展進程中，脂肪組織巨噬細胞(adipose tissue macrophages，ATMs)的數(shù)量、表型和分布發(fā)生重大改變。肥胖個體中，ATMs以促炎M1型巨噬細胞為主，分布于正在死亡的脂肪細胞周圍。M1型ATMs分泌TNF-α等炎性因子，造成脂肪組織炎癥狀態(tài)。此外TNF-α還可通過與脂肪細胞釋放的游離脂肪酸(free fatty acid

2、s，F(xiàn)FAs)構成旁分泌環(huán)路加劇脂肪組織炎癥。ATMs被認為是肥胖相關炎癥的主要貢獻者，因而可將ATMs表型的變化作為研究肥胖相關炎癥和胰島素抵抗等疾病的標靶。
　　表沒食子兒茶素沒食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate，EGCG)是綠茶多酚中的主要活性成分，具有抗炎、抗腫瘤、抗氧化等多種生物活性。在體外研究中已經(jīng)證實，EGCG干預可下調(diào)M1型巨噬細胞標志物的表達，上調(diào)M2型巨噬細胞標志物的表達。動物模型研

3、究也表明，食源性EGCG干預可減少脂肪組織中ATMs的含量，但EGCG能否影響在體ATMs的極化還未見相關研究報道。本研究通過使用食源性EGCG干預高脂膳食誘導的肥胖小鼠，以探究食源性EGCG對ATMs極化的影響及其對肥胖小鼠的減重效果。
　　本研究中選用三周齡雄性ICR小鼠通過高脂膳食誘導構建肥胖模型，將ICR小鼠適應性喂養(yǎng)一周后，分為正常飲食組（n=10）和高脂膳食誘導組（n=75），分別飼喂普通飼料和高脂飼料。誘導五周后，共

4、有43只小鼠造模成功，造模成功率為57.3％。將造模成功的肥胖小鼠分為高脂組，和低、中、高劑量EGCG干預組（n=10）。在EGCG干預6周后，將小鼠禁食不進水12h，測量小鼠體重與附睪脂肪組織濕重，摘眼球取血后采用酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)檢測血清中空腹胰島素(FINS)、空腹血糖(FBG)、游離脂肪酸(FFAs)和瘦素(LEP)水平，以探究食源性EGCG對膳食誘導型肥胖小鼠代謝參數(shù)的影響;取小鼠附睪脂肪組織，提取總RNA與總蛋白

5、，以F4/80作為成熟巨噬細胞的標志物，CD11c和iNOS作為M1型巨噬細胞的標志物，CD206作為M2型巨噬細胞的標志物，通過實時熒光定量PCR(qRT-PCR)和ELISA分別測量附睪脂肪組織中巨噬細胞標志物F4/80、CD11c、iNOS和CD206的基因表達水平和蛋白表達水平，以探究食源性EGCG干預對膳食誘導型肥胖小鼠ATMs極化的影響。結果顯示，食源性EGCG干預以劑量依賴方式減輕膳食誘導型肥胖小鼠的體重與附睪脂肪濕重，減

6、少 FINS、FBG、LEP和循環(huán)FFAs水平，減少脂肪組織中浸潤的巨噬細胞數(shù)目，下調(diào)M1巨噬細胞標志物CD11c和iNOS的表達，并上調(diào)M2巨噬細胞標志物CD206的表達。本研究表明EGCG具有減重減脂功效，可緩解肥胖個體中胰島素抵抗和瘦素抵抗情況，減少脂肪組織中浸潤的巨噬細胞數(shù)目并影響ATMs的極化。本研究將ATMs的極化作為研究脂肪組織炎癥的靶標，為探究和治療肥胖及肥胖相關炎癥提供了新的視角，也為EGCG作為潛在的減肥藥物和保健品