表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯對(duì)附睪脂肪組織巨噬細(xì)胞極化的影響.pdf

1、肥胖是一種與代謝相關(guān)的全身慢性輕度炎癥，與胰島素抵抗、Ⅱ型糖尿病等疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。在肥胖發(fā)展進(jìn)程中，脂肪組織巨噬細(xì)胞(adipose tissue macrophages，ATMs)的數(shù)量、表型和分布發(fā)生重大改變。肥胖個(gè)體中，ATMs以促炎M1型巨噬細(xì)胞為主，分布于正在死亡的脂肪細(xì)胞周?chē)?。M1型ATMs分泌TNF-α等炎性因子，造成脂肪組織炎癥狀態(tài)。此外TNF-α還可通過(guò)與脂肪細(xì)胞釋放的游離脂肪酸(free fatty acid

2、s，F(xiàn)FAs)構(gòu)成旁分泌環(huán)路加劇脂肪組織炎癥。ATMs被認(rèn)為是肥胖相關(guān)炎癥的主要貢獻(xiàn)者，因而可將ATMs表型的變化作為研究肥胖相關(guān)炎癥和胰島素抵抗等疾病的標(biāo)靶。
　　表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate，EGCG)是綠茶多酚中的主要活性成分，具有抗炎、抗腫瘤、抗氧化等多種生物活性。在體外研究中已經(jīng)證實(shí)，EGCG干預(yù)可下調(diào)M1型巨噬細(xì)胞標(biāo)志物的表達(dá)，上調(diào)M2型巨噬細(xì)胞標(biāo)志物的表達(dá)。動(dòng)物模型研

3、究也表明，食源性EGCG干預(yù)可減少脂肪組織中ATMs的含量，但EGCG能否影響在體ATMs的極化還未見(jiàn)相關(guān)研究報(bào)道。本研究通過(guò)使用食源性EGCG干預(yù)高脂膳食誘導(dǎo)的肥胖小鼠，以探究食源性EGCG對(duì)ATMs極化的影響及其對(duì)肥胖小鼠的減重效果。
　　本研究中選用三周齡雄性ICR小鼠通過(guò)高脂膳食誘導(dǎo)構(gòu)建肥胖模型，將ICR小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，分為正常飲食組（n=10）和高脂膳食誘導(dǎo)組（n=75），分別飼喂普通飼料和高脂飼料。誘導(dǎo)五周后，共

4、有43只小鼠造模成功，造模成功率為57.3％。將造模成功的肥胖小鼠分為高脂組，和低、中、高劑量EGCG干預(yù)組（n=10）。在EGCG干預(yù)6周后，將小鼠禁食不進(jìn)水12h，測(cè)量小鼠體重與附睪脂肪組織濕重，摘眼球取血后采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)血清中空腹胰島素(FINS)、空腹血糖(FBG)、游離脂肪酸(FFAs)和瘦素(LEP)水平，以探究食源性EGCG對(duì)膳食誘導(dǎo)型肥胖小鼠代謝參數(shù)的影響;取小鼠附睪脂肪組織，提取總RNA與總蛋白

5、，以F4/80作為成熟巨噬細(xì)胞的標(biāo)志物，CD11c和iNOS作為M1型巨噬細(xì)胞的標(biāo)志物，CD206作為M2型巨噬細(xì)胞的標(biāo)志物，通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)和ELISA分別測(cè)量附睪脂肪組織中巨噬細(xì)胞標(biāo)志物F4/80、CD11c、iNOS和CD206的基因表達(dá)水平和蛋白表達(dá)水平，以探究食源性EGCG干預(yù)對(duì)膳食誘導(dǎo)型肥胖小鼠ATMs極化的影響。結(jié)果顯示，食源性EGCG干預(yù)以劑量依賴(lài)方式減輕膳食誘導(dǎo)型肥胖小鼠的體重與附睪脂肪濕重，減

6、少 FINS、FBG、LEP和循環(huán)FFAs水平，減少脂肪組織中浸潤(rùn)的巨噬細(xì)胞數(shù)目，下調(diào)M1巨噬細(xì)胞標(biāo)志物CD11c和iNOS的表達(dá)，并上調(diào)M2巨噬細(xì)胞標(biāo)志物CD206的表達(dá)。本研究表明EGCG具有減重減脂功效，可緩解肥胖個(gè)體中胰島素抵抗和瘦素抵抗情況，減少脂肪組織中浸潤(rùn)的巨噬細(xì)胞數(shù)目并影響ATMs的極化。本研究將ATMs的極化作為研究脂肪組織炎癥的靶標(biāo)，為探究和治療肥胖及肥胖相關(guān)炎癥提供了新的視角，也為EGCG作為潛在的減肥藥物和保健品