表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)對鼻咽癌CNE2細胞端粒酶活性的影響。.pdf

1、【背景】
　　鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)是頭頸部常見惡性腫瘤，臨床上以放療和化療為主要治療手段，雖然隨著調(diào)強放療技術(shù)發(fā)展，鼻咽患者治愈率提高及副反應(yīng)減少，但是晚期患者五年生存率仍不理想，且放療后仍有不可忽視的毒性反應(yīng)。而且容易產(chǎn)生多藥耐藥（multidrug resistance，MDR）現(xiàn)象。目前，尋找出高效、不良反應(yīng)小的新一代抗腫瘤藥物已是當務(wù)之急。表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）是

2、綠茶多酚的主要成份，從綠茶中提練出來的一種高效低毒的天然化合物，同時兼有抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)雙重作用，因此研究EGCG抗鼻咽癌的藥理作用機制，具有重大的理論及實踐意義，具有廣闊的市場前景。
　　隨著國內(nèi)外對EGCG研究的深入，其抑制腫瘤細胞增殖及促進腫瘤細胞凋亡已達到共識[1-3]。但其具體機制不是明確。端粒酶是一種具有逆轉(zhuǎn)錄活性的DNA聚合酶，它與細胞生長密切相關(guān)。大部分人類體細胞無或低端粒酶活性，故其分裂次數(shù)有限，最終細胞走向衰老

3、與凋亡。相反，少部分增殖活躍人類體細胞、生殖細胞與大部分腫瘤細胞（約占90％）其端粒酶活化，端粒不因復制而縮短，細胞走向永生化。端粒酶包含具有逆轉(zhuǎn)錄酶活性的逆轉(zhuǎn)錄蛋白（human telomerase reverse transcriptase protein，hTERT）和端粒酶RNA（TERC/TR）。hTERT是端粒酶的催化亞基，也是端粒酶激活的關(guān)鍵限速因子。本文將從細胞分子水平探討 EGCG對鼻咽癌細胞株CNE2的端粒酶hTER

4、T及其基因表達的影響，為探討廣譜天然綠茶多酚EGCG在體內(nèi)、外的抗鼻咽癌機制，為EGCG的新藥開發(fā)提供理論和科研依據(jù)。
　　【目的】
　　通過細胞生物學、分子生物學實驗，探討廣譜天然綠茶多酚EGCG在體外鼻咽癌CNE2細胞的抗鼻咽癌機制，為EGCG的新藥開發(fā)提供理論和科研依據(jù)。
　　【方法】
　　1.通CCK-8試驗來檢測EGCG對鼻咽癌CNE2細胞株的增殖抑制作用。
　　2.通過流式細胞學實驗檢測EGCG

5、對鼻咽癌CNE2細胞株周期及凋亡的影響。
　　3.利用RT-PCR實驗來檢測EGCG對鼻咽癌CNE2細胞株hTERT mRNA表達的影響。
　　4.利用Western blot實驗來檢測EGCG對鼻咽癌CNE2細胞株hTERT蛋白及c-Myc蛋白表達的影響。
　　【結(jié)果】
　　1. EGCG對鼻咽癌CNE2細胞株的增殖具有明顯抑制作用，且呈現(xiàn)時間及藥物濃度依賴性。
　　2. EGCG具有阻滯鼻咽癌CNE2細

6、胞周期進展作用，使G0/G1期比例升高（P<0.001），S期比例下降（P<0.002）。低濃度組（100ug/mL）細胞周期阻滯呈時間依賴性，隨著濃度增大及作用時間廷長細胞周期阻滯時間依賴性不明顯，但細胞凋亡率升高。
　　3. EGCG具有促鼻咽癌CNE2細胞凋亡作用，隨著作用時間廷長其凋亡率升高（P<0.001）,呈時間依賴性。
　　4. EGCG具有下調(diào)鼻咽癌CNE2細胞株hTERT mRNA（P<0.001）及其蛋白