茶葉下腳料中表沒食子兒茶素沒食子酸酯分離純化工藝研究.pdf

1、茶為山茶科植物茶(Camellia siaensis(L.)O.Ktze.var.sinensis)的干燥葉,始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,藥用歷史悠久。茶葉中有多種活性成分,其中酯型兒茶素表沒食子兒茶素沒食子酸酯(簡稱EGCG)具有抗癌,抗突變、抗腫瘤形成、抗炎癥、抗病毒、清除自由基和抗氧化等作用而極具開發(fā)價值。恩施州近年來茶業(yè)產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速,在十二五期間將新建茶園20萬畝,每年改造老茶園4萬畝,建成高標準無性系良種茶園100萬畝。在茶園新建和

2、改造過程中,會產(chǎn)生大量的茶葉下腳料,這些下腳料可以用來生產(chǎn)高純度的EGCG。因此,本論文對恩施州產(chǎn)茶葉下腳料中EGCG的提取純化工藝進行了研究。
　　 采用HPLC法建立茶葉下腳料中EGCG的含量以及EGCG產(chǎn)品的含量測定方法。色譜條件為:C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流動相為乙腈一水一冰醋酸(14:84:2),流速1.0 m1·min-1,檢測波長276 nm。結(jié)果,EGCG在1.66～8.30μg范圍內(nèi)線性關(guān)系

3、良好,平均加樣回收率為100.26％(RSD=1.41%)。方法簡便,準確,重復性好,為原材料和產(chǎn)品的質(zhì)量控制提供了依據(jù)。
　　 以EGCG的浸出量為指標,采用溶劑熱浸法對茶葉下腳料中EGCG的提取工藝條件進行研究。在單因素實驗的基礎(chǔ)上,采用L9(34)正交實驗法優(yōu)選了提取工藝。結(jié)果表明,選定的提取工藝參數(shù)可靠,條件穩(wěn)定。
　　 采用大孔吸附樹脂色譜與凝膠色譜相結(jié)合的方法,對茶葉下腳料提取物中的EGCG進行了分離純化。采

4、用靜態(tài)吸附和動態(tài)吸附相結(jié)合的方法對大孔樹脂純化工藝進行了研究,采用所研究的工藝條件,得到EGCG粗品的純度達60%;采用葡聚糖凝膠Sephadex LH-20對得到的EGCG粗品進行了進一步純化,以EGCG純度和回收率為指標,在單因素實驗的基礎(chǔ)上,采用L9(34)正交實驗法優(yōu)選了提取工藝,最佳純化工藝條件為:采用徑高比為1:20的凝膠樹脂柱,以濃度為10%且含有2%冰醋酸的乙醇溶液以0.8ml·min-1洗脫。該工藝條件下,EGCG的純