表沒食子兒茶素沒食子酸酯對牛卵母細胞體外成熟和冷凍精液品質(zhì)的影響.pdf

1、活性氧自由基(Reactive oxygen species，ROS)在維持哺乳動物雌雄配子正常的生理功能方面發(fā)揮著重要作用，但過量ROS會導致氧化應激從而對哺乳動物雌雄配子造成損傷。表沒食子兒茶素沒食子酸酯（epigallocatechin-3-gallate，EGCG）是茶葉中兒茶素的一種主要成分，因其具有強抗氧化特性而被認為最有前景的生物活性物質(zhì)之一，它能清除ROS從而提高雌雄配子質(zhì)量。因此，本研究在牛體外卵母細胞成熟液和冷凍-解

2、凍后精液中添加不同濃度的EGCG探究其對牛卵母細胞體外成熟和冷凍精液品質(zhì)的影響。研究結(jié)果如下:
　　1、探究牛卵母細胞體外成熟培養(yǎng)液中添加不同濃度EGCG(0、25、50、100、200μM)對牛卵母細胞核成熟和胞質(zhì)成熟、卵丘擴展、ROS水平、總抗氧化能力、早期凋亡和體外受精后早期胚胎發(fā)育能力的影響，并檢測卵母細胞內(nèi)抗氧化相關基因表達探究其可能的作用機制。結(jié)果表明:(1)與對照組相比，50μMEGCG顯著提高牛卵母細胞第一極體排出

3、率、皮質(zhì)顆粒外周和皮質(zhì)區(qū)分布的卵母細胞百分率和線粒體均勻分布的卵母細胞百分率(P＜005)。(2)與對照組相比，25μM和50μMEGCG顯著提高卵丘擴展指數(shù)，50μMEGCG處理顯著促進卵丘擴展基因(HAS2、TNFA IP6、PTX和PTGS2)mRNA表達(P＜0.05)。(3)與對照組相比，50μMEGCG處理不僅顯著降低牛卵母細胞內(nèi)ROS水平和早期凋亡卵母細胞比例，還顯著提高牛卵母細胞總抗氧化能力(P＜0.05)。(4)50μ

4、MEGCG處理組牛卵母細胞體外受精后早期胚卵裂率和囊胚率顯著高于對照組(P＜0.05)。(5)50μMEGCG處理組牛卵母細胞中抗氧化相關基因(NRF2、SOD1、CAT和GPX4)mRNA表達量顯著高于對照組(P＜005)。
　　2、牛冷凍-解凍精液中添加不同濃度EGCG(0、5、10、20μM)385℃孵育1h后對精子活力及運動學參數(shù)、結(jié)構(gòu)完整性、精子中抗氧化相關酶活力、MDA含量和體外受精后早期胚胎發(fā)育能力進行檢測。結(jié)果表明

5、:(1)10μM EGCG處理組精子活力(TM，％)和鞭打頻率(BCF,Hz)顯著高于對照組(P＜0.05)。(2)與對照組相比，5μM，10μM和20μEGCG處理組精子質(zhì)膜和頂體完整率顯著升高(P＜005);5μM和10μM EGCG處理組精子線粒體膜完整率顯著升高(P＜005)。(3)與對照組相比，10μM EGCG處理能夠顯著提高精子中SOD和CAT活力，降低LDH活力和MDA含量(P＜005)，但AST活力無顯著變化;20μM