PI3K-AKT信號(hào)通路在PDGF促進(jìn)人晶狀體上皮細(xì)胞增殖中的作用.pdf

1、目的：
　　后發(fā)性白內(nèi)障（posterior capsule opacification，PCO）也稱后囊膜混濁，是白內(nèi)障術(shù)后及晶狀體外傷后最常見的并發(fā)癥。研究表明殘留的晶狀體上皮細(xì)胞增殖在PCO的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮著十分重要的作用，但其增殖的具體原理尚未完全闡明，本研究探討體外應(yīng)用血小板源性生長(zhǎng)因子(platelet derived growth factor,PDGF)及PI3K（phosphatidylinositols-kin

2、ase）信號(hào)通路抑制劑LY294002分別或同時(shí)刺激人源晶狀體上皮細(xì)胞（lens epithelial cells,LECs）株SRA01/04，以探討PI3K-AKT信號(hào)通路在PDGF促進(jìn)人晶狀體上皮細(xì)胞增殖中的作用。
　　方法：
　　人晶狀體上皮細(xì)胞株SRA01/04常規(guī)傳代培養(yǎng)，用不同濃度的PDGF（0ng/ml,0.1ng/ml,1ng/ml,10ng/ml，100ng/ml），不同濃度LY294002（0μM,5μ

3、M,10μM，20μM，40μM）以及不同濃度的PDGF（10ng/ml）+LY294002（0μM,5μM,10μM，20μM，40μM）分別作用于SRA01/04細(xì)胞24小時(shí)，MTT法檢測(cè)各組細(xì)胞的增殖率或增殖抑制率；根據(jù)MTT結(jié)果，選定各藥物組濃度，將實(shí)驗(yàn)分為四組，即空白對(duì)照組、PDGF組（PDGF濃度為10ng/ml）、LY294002組（LY294002濃度為40μM）、PDGF+LY294002組（10ng/ml的PDGF+

4、40μM的LY294002），各組細(xì)胞培養(yǎng)24h,倒置顯微鏡下觀察各組晶狀體上皮細(xì)胞增殖、抑制的情況;蛋白印跡法檢測(cè)各組細(xì)胞中總AKT及P-AKT的蛋白表達(dá)量差異。
　　結(jié)果：
　　1、人晶狀體上皮細(xì)胞SRA01/04的增殖率與PDGF的濃度呈正相關(guān)（P＜0.001）；
　　2、人晶狀體上皮細(xì)胞SRA01/04的增殖的抑制率與LY294002的濃度呈正相關(guān)（P＜0.001）；
　　3、PDGF促人晶狀體上皮細(xì)胞S

5、RA01/04的增殖作用與LY294002的濃度呈負(fù)相關(guān)（P＜0.001）；
　　4、PDGF、LY294002分別或同時(shí)干預(yù)人晶狀體上皮細(xì)胞SRA01/04時(shí)細(xì)胞總AKT表達(dá)無(wú)明顯差異（P=0.066）；
　　5、PDGF單獨(dú)干預(yù)人晶狀體上皮細(xì)胞SRA01/04時(shí)細(xì)胞p-AKT表達(dá)量增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）；
　　6、LY294002單獨(dú)干預(yù)人晶狀體上皮細(xì)胞SRA01/04時(shí)細(xì)胞p-AKT表達(dá)量減少，

6、差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）；
　　7、PDGF和LY294002同時(shí)干預(yù)人晶狀體上皮細(xì)胞SRA01/04時(shí)細(xì)胞p-AKT表達(dá)量較PDGF單獨(dú)干預(yù)時(shí)減少而較LY294002單獨(dú)干預(yù)時(shí)增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P＜0.001）。
　　結(jié)論：
　　1、PDGF能促進(jìn)人晶狀體上皮細(xì)胞的增殖；
　　2、LY294002能抑制人晶狀體上皮細(xì)胞的增殖；
　　3、PDGF促進(jìn)人晶狀體上皮細(xì)胞的增殖作用能被LY294