B類Ⅰ型清道夫受體的高表達是結(jié)腸癌患者的有利預(yù)后因素.pdf

1、研究背景:
　　結(jié)腸癌是臨床中發(fā)病率較高的疾病。近年來隨著人們生活水平的改善，結(jié)腸癌的發(fā)病率也在逐年的升高。在近年的調(diào)查中發(fā)現(xiàn)在所有癌癥患者中結(jié)腸癌的發(fā)病率居全世界第3位，并且女性患者普遍高于男性患者，平均每年有數(shù)十萬的結(jié)腸癌患者死亡，因此對于結(jié)腸癌的研究和治療具有重要的臨床意義。流行病學(xué)顯示，結(jié)腸癌的發(fā)生與高脂飲食，肥胖，飲酒，缺乏鍛煉密切相關(guān)。既往研究表明，結(jié)腸癌的進展與血脂水平異常，特別是血漿高密度脂蛋白(High-dens

2、itylipoprotein，HDL)的水平下降相關(guān)。
　　B類Ⅰ型清道夫受體(scavenger receptor class B typeⅠ，SR-BI)是第一個在分子水平上得到確證的高密度脂蛋白受體，體內(nèi)SR-BI表達相對廣泛，主要表達于肝臟和腎上腺、卵巢、睪丸等固醇激素生成組織。SR-BI是HDL中膽固醇及膽固醇酯轉(zhuǎn)運的重要受體，參與體內(nèi)膽固醇逆向轉(zhuǎn)運過程。SR-BI作為體內(nèi)HDL的一種生理相關(guān)性受體，除了介導(dǎo)HDL抗炎、

3、抗血栓、抗氧化等作用外，它還具有其它多種生物學(xué)作用，如在膿毒癥、丙型肝炎病毒入侵、炎癥、先天免疫、正常紅細胞成熟和雌性生育等方面都有重要的調(diào)節(jié)作用。隨后研究證實，SR-BI在某些腫瘤細胞系中高表達，包括前列腺癌、肝癌、卵巢癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、胰腺癌和鼻咽癌。然而，SR-BI在結(jié)腸癌組織中的表達情況及其臨床意義尚沒有相關(guān)研究報道。
　　在本課題中，我們首先應(yīng)用生物信息學(xué)分析了脂質(zhì)代謝相關(guān)基因在結(jié)腸癌患者與正常人之間的不同表達水平以及

4、各基因與臨床病理變量的關(guān)系，證實了SCARB1是參與膽固醇內(nèi)化的5個基因中唯一在結(jié)腸癌患者中上調(diào)的基因。其次，我們利用組織芯片免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測了SR-BI在90例結(jié)腸癌組織及其相應(yīng)癌旁組織標本的表達情況，分析了SR-BI的表達與患者各臨床病理變量、預(yù)后的關(guān)系，證實SR-BI的表達雖與各臨床病理變量無相關(guān)性，但是影響結(jié)腸癌預(yù)后的獨立危險因素。
　　目的:
　　1.應(yīng)用生物信息學(xué)分析脂質(zhì)代謝相關(guān)基因在結(jié)腸癌患者與正常人之間的

5、不同表達水平以及各基因與臨床病理變量的關(guān)系。
　　2.采用含90例結(jié)腸癌組織及其相應(yīng)癌旁組織標本的組織芯片檢測SR-BI蛋白的表達情況。
　　3.分析SR-BI的表達與結(jié)腸癌患者各臨床病理變量之間的關(guān)系，并探討SR-BI的表達狀態(tài)與患者的預(yù)后關(guān)系，以期尋找新的結(jié)腸癌預(yù)后指標和潛在的治療靶點。
　　方法:
　　1.以癌癥基因庫(The Cancer Genome Altas，TCGA)提供的245例結(jié)腸癌患者及21

6、例正常人的17組與脂質(zhì)代謝相關(guān)基因信息為研究對象，分析脂質(zhì)代謝相關(guān)基因在結(jié)腸癌患者與正常人之間的不同表達水平以及各基因與臨床病理變量的關(guān)系。脂質(zhì)代謝相關(guān)基因在結(jié)腸癌患者與正常人之間的不同表達水平采用T檢驗進行評估。各基因與臨床病理變量的關(guān)系采用單因素方差分析進行評價。
　　2.采用免疫組織化學(xué)染色的方法對購自上海芯超生物科技有限公司的含90例結(jié)腸癌組織和相對應(yīng)的癌旁組織的芯片進行SR-BI表達的檢測，并分析其與結(jié)腸癌癌的發(fā)生發(fā)展、

7、臨床病理特征及患者預(yù)后的關(guān)系。免疫組織化學(xué)SR-BI染色的評分由兩個獨立的病理學(xué)家進行，屏蔽患者的臨床信息和預(yù)后情況。評分的方法應(yīng)用改進的免疫反應(yīng)評分法（immune response scoring method，IRS），主要評價染色細胞的百分比(無染色，0;＜10％，1;10-50％，2;51-80％，3;＞80％，4)和染色強度（無染色，0;弱，1;中度，2;強，3）。染色強度和染色陽性細胞數(shù)比例的乘積得分（范圍從0到12）作為

8、每例患者的最終得分。在隨后的統(tǒng)計分析中應(yīng)用兩級分層。腫瘤標本評分最后在0-4之間認為是SR-BI低表達，而≥6認為是高表達。SR-BI的表達與臨床病理特征之間的關(guān)系采用卡方檢驗或Fisher精確檢驗進行評估，取決于不同的臨床病理參數(shù)的數(shù)值性質(zhì)和正態(tài)分布性。生存分析采用Kaplan-Meier生存分析進行評價，并用Log-rank檢驗各變量對生存時間(overall survival，OS)的影響。多因素分析采用Cox比例風(fēng)險模型來計算，

9、計算風(fēng)險比(hazard ratio，HR)和95％可信區(qū)間(confidence interval，CI)。
　　結(jié)果:
　　1.相比于正常人，5個基因在結(jié)腸癌患者中明顯上調(diào)，SCARB1(P=0.000)，金屬蛋白酶組織抑制物1(TIMP1，P=0.000)，基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9，P=0.000)，固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子1（SREBF1，P=0.028），脂肪酸合酶(FASN，P=0.000)。9個基因在結(jié)腸癌

10、患者中明顯下調(diào)，組織蛋白酶S(CTSS，P=0.000)，膽固醇脂化微囊蛋白1(CAV1，P=0.001)，極低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白(VLDLR，P=0.000)，ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運子1(ABCA1，P=0.000)，乙酰輔酶A乙酰轉(zhuǎn)移酶1(ACAT1，P=0.000)，分化抗原簇36(CD36，P=0.000)，3-羥基-3-甲基-戊二酸-輔酶A還原酶(HMG-CoAR，P=0.047)，固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子2(SREBF2，P=

11、0.001)，肝X受體激動劑α(LXR-α，P=0.000)。
　　2.CD36(P=0.002)，CTSS(P=0.028)，VLDLR(P=0.020)在結(jié)腸癌患者中的表達水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的陽性率相關(guān)。CTSS(P=0.025)，ACAT1(P=0.006)， MMP-9(P=0.003)，HMG-CoAR(P=0.005)與T分期相關(guān)。LDLRP(P=0.041)和MMP-9(P=0.047)與腫瘤分級相關(guān)。值得注意的是SC

12、ARB1的表達水平與各臨床病理變量無關(guān)。
　　3.在90例結(jié)腸癌組織標本中，51例(56.7％)為SR-BI高表達，39例(43.3％)為SR-BI低表達。在90例相對應(yīng)的癌旁組織中，48例(53.3％)為SR-BI高表達，42例(46.7％)為SR-BI低表達。SR-BI在大多數(shù)結(jié)腸癌組織比相對應(yīng)的癌旁組織表達高(P=0.000)。
　　4.與SCARB1的表達水平與各臨床病理變量無關(guān)的結(jié)果一致，SR-BI的表達水平與性別

13、、年齡、腫瘤pTNM分期、腫瘤大小、腫瘤分級、淋巴結(jié)總數(shù)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的陽性率、AJCC臨床分期無關(guān)。
　　5.在結(jié)腸癌組織中，SR-BI低表達的患者比SR-BI高表達的患者總體生存率(0S)縮短（log-rank檢驗，P=0.042）。Cox回歸多因素分析提示SR-BI的高表達是影響預(yù)后的獨立有利因素，HR為0.502(P=0.039)，除了SR-BI之外，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的陽性率也是結(jié)腸癌患者預(yù)后的獨立因素(P=0.007)。

14、　　結(jié)論:
　　1.基因SCARB1的表達水平在結(jié)腸癌患者中上調(diào)。
　　2.結(jié)腸癌組織SR-BI表達水平比癌旁組織高。
　　3.結(jié)腸癌組織中SR-BI的表達水平與結(jié)腸癌患者的生存相關(guān)。SR-BI表達水平越低，預(yù)后越差。
　　4.結(jié)腸癌組織中SR-BI的表達水平是結(jié)腸癌患者的獨立預(yù)后因素。
　　研究意義:
　　SR-BI的低表達狀態(tài)與結(jié)腸癌患者不良預(yù)后有關(guān)，SR-BI的表達可能被作為結(jié)腸癌的惡性指標之一