藏藥肝寧膠囊的提取工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、慢性肝病包括病毒性肝炎、非酒精性脂肪肝、酒精性肝病、代謝性肝病、藥物性肝病、免疫性肝病、肝硬化和肝癌等常見病。在我國(guó)發(fā)病率高，并呈上升趨勢(shì)。由于其病程長(zhǎng)，遷延難愈，已經(jīng)成為全球公共衛(wèi)生關(guān)注的焦點(diǎn)之一。目前，國(guó)內(nèi)外采用先進(jìn)的科學(xué)技術(shù)及醫(yī)學(xué)方法對(duì)該病進(jìn)行了大量的臨床和實(shí)驗(yàn)研究，然而效果并不十分滿意。因此，開發(fā)一種新的慢性肝病治療藥物已經(jīng)迫在眉睫。藏藥肝寧膠囊處方源于藏醫(yī)臨床經(jīng)驗(yàn)方，由金腰草、川西獐牙菜、甘青青蘭、波棱瓜子、止瀉木子、鴨嘴花等

2、12味藏藥組成，在西藏地區(qū)廣泛用于治療各種肝膽疾病。原處方為散劑，生產(chǎn)工藝落后，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)偏低，使用和攜帶不便。本研究旨在確保原方療效與特色的前提下，對(duì)該方進(jìn)行系統(tǒng)的制備工藝和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究，以期開發(fā)出一種制備工藝合理，質(zhì)量穩(wěn)定可控的創(chuàng)新藥物，減輕肝病患者的痛苦。
　　方中主藥金腰草的化學(xué)成分報(bào)道較少，藥效物質(zhì)基礎(chǔ)尚不明確。本課題對(duì)金腰草的化學(xué)成分進(jìn)行了研究，并采用一測(cè)多評(píng)法測(cè)定了其中主要化學(xué)成分的含量。結(jié)果從中分離得到11個(gè)化合物，

3、分別為：對(duì)羥基苯乙酮、Chrysosplenoside D、Pendulin、Chrysosplenoside B、Chrysosplenol D、葫蘆素D、金腰素乙、噴杜素、ArveninⅠ和2β-glucosyloxy-16,20,22-trihydroxy-9-methyl-19-norlanosta-5,24-diene-3,11-dione。此外還得到1個(gè)新化合物。這11種成分均為首次從該植物中分離得到。其中Penduleti

4、n，Chrysosplenoside D，Pendulin和Chrysosplenoside B的含量分別為5.84、3.51、2.76和10.52 mg?g-1。為后期的提取工藝設(shè)計(jì)奠定了基礎(chǔ)。
　　川西獐牙菜為方中另一味主藥?，F(xiàn)行藏藥標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)川西獐牙菜的質(zhì)量控制僅有―性狀和―鑒別項(xiàng)的規(guī)定，不能有效地控制其質(zhì)量。為了更好地控制藥材及制劑的質(zhì)量，本文建立了川西獐牙菜中主要活性成分獐牙菜苷和芒果苷的含量測(cè)定方法：流動(dòng)相為甲醇(A)-

5、0.8％冰醋酸水溶液(B)，梯度洗脫（0~30 min，20%A→45%A；30~60 min，45%A→100%A），流速為1.0 mL?min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm，柱溫30℃，進(jìn)樣量10μL。結(jié)果獐芽菜苷在質(zhì)量濃度23.24~69.72μg?mL-1，芒果苷在質(zhì)量濃度110.12~330.36μg?mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。測(cè)得川西獐牙菜中獐芽菜苷的含量為1.32 mg?g-1，芒果苷含量為5.85 mg?g-1。該方法簡(jiǎn)便

6、可靠，重現(xiàn)性好，為提取工藝的研究提供了可靠的檢測(cè)指標(biāo)，也為肝寧膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究提供了定量依據(jù)。
　　本研究根據(jù)處方中各味藥材有效成分的理化性質(zhì)，初步設(shè)計(jì)了4種提取工藝，通過(guò)急性四氯化碳肝損傷模型，考察不同提取工藝對(duì)藥效學(xué)的影響。同時(shí)，對(duì)不同提取工藝的浸膏得率，芒果苷轉(zhuǎn)移率，總齊墩果酸含量和總黃酮含量進(jìn)行了測(cè)定。綜合各項(xiàng)指標(biāo)結(jié)果，篩選出藏藥肝寧膠囊的提取工藝。隨后，設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)對(duì)所選工藝進(jìn)行優(yōu)化，最終確定藏藥肝寧膠囊的制備工藝如下

7、：金腰草、川西獐牙菜、甘青青蘭、波棱瓜子、止瀉木子和鴨嘴花6味藥材采用14倍量65%乙醇回流提取2次，每次2 h；所得提取物與其他藥材粉末混合均勻，加入可溶性淀粉45%，70%乙醇制軟材，過(guò)20目篩制粒，60~70℃干燥，過(guò)20目篩整粒，再加入5%硬脂酸鎂調(diào)節(jié)流動(dòng)性，裝入膠囊，即得。
　　為了保證肝寧膠囊的質(zhì)量，本文對(duì)其進(jìn)行了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。按照《中國(guó)藥典》（2015年版）膠囊劑項(xiàng)下規(guī)定，對(duì)肝寧膠囊的水分、崩解時(shí)限、裝量差異等進(jìn)行了