二氫丹參酮Ⅰ對NF-κB信號通路作用機制及其抗腫瘤作用研究.pdf

1、NF-κB是一類關(guān)鍵性的核轉(zhuǎn)錄因子，一般在各種細胞中都有且以非活化的同源二聚體或異源二聚體的形式存在于胞質(zhì)中，具有十分重要的功能。眾所周知，NF-κB是多種信號途徑中的重要的一環(huán)，擁有許多的生物學活性，與許多各種生理的以及病理的過程有關(guān)，比如炎癥、腫瘤等，參與以及調(diào)控細胞增殖和細胞凋亡等的相關(guān)過程。由此可知，通過抑制NF-κB為核心的信號轉(zhuǎn)導途徑，可能為防治某些疾病開辟新途徑。
　　二氫丹參酮Ⅰ是從唇形科植物丹參中提取出來的一種天

2、然產(chǎn)物，紅色針狀結(jié)晶，具有抗菌、抗炎、抗腫瘤活性。本次研究主要利用Hela細胞給予不同濃度的二氫丹參酮Ⅰ檢測其對NF-κB活化的影響，以及檢測了其對細胞凋亡的影響;其次是利用裸鼠移植瘤實驗來檢測二氫丹參酮Ⅰ對腫瘤增殖的影響。其中，噻唑藍比色分析法(MTT)主要檢測藥物對Hela細胞的毒性大小;利用熒光素酶報告基因?qū)嶒灆z測藥物對NF-κB轉(zhuǎn)錄活性的影響;蛋白免疫印跡實驗則在蛋白水平上檢測了藥物對NF-κB蛋白表達及其靶蛋白表達的影響;通過

3、RT-PCR實驗在RNA水平上檢測藥物對IL-6/TNF-α/VEGF mRNA表達的影響;免疫熒光試驗主要檢測藥物對p65核移位的影響;通過流式細胞術(shù)檢測藥物對Hela細胞凋亡率的影響;體內(nèi)試驗中，通過建立裸鼠移植瘤模型檢測藥物對腫瘤增殖的影響。
　　熒光素酶報告基因及MTT實驗證明，二氫丹參酮Ⅰ可抑制NF-κB的活化且沒有明顯的細胞毒性。通過蛋白免疫印跡實驗得出二氫丹參酮Ⅰ可劑量性的抑制IκBα的磷酸化和降解，抑制p65的磷酸