MBL與高糖培養(yǎng)系膜細(xì)胞炎癥因子表達(dá)的相關(guān)性及雷公藤多苷對(duì)其干預(yù)性研究.pdf

1、研究目的：
　　1.通過(guò)體外培養(yǎng)的大鼠系膜細(xì)胞觀察高糖環(huán)境對(duì)大鼠系膜細(xì)胞甘露糖結(jié)合凝集素（ Mannose-binding lectin,MBL）和甘露糖結(jié)合凝集素相關(guān)絲氨酸蛋白酶2（MBL-associated serine protease-2，MASP2）基因及蛋白表達(dá)的影響，以及MBL對(duì)高糖培養(yǎng)下大鼠系膜細(xì)胞增殖及腫瘤壞死因子-β（Tumor necrosis factor,TNF-β）、白介素-6（Interleukin

2、-6,IL-6）、IL-8、IL-17的調(diào)節(jié)作用。
　　2.觀察雷公藤多苷干預(yù)以后，高糖培養(yǎng)下大鼠系膜細(xì)胞 MBL、MASP2及炎癥因子的表達(dá)變化情況，進(jìn)一步探討雷公藤多苷對(duì)糖尿病腎病的可能保護(hù)機(jī)制。
　　研究方法：
　　20只健康SD大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)2周后，隨機(jī)分為正常對(duì)照組10只和雷公藤多苷組10只，雷公藤多苷組給予雷公藤多苷片，按臨床成人常規(guī)用量的10倍10mg·kg-1·d-1溶解后經(jīng)口灌胃，連續(xù)7天后取血清。大

3、鼠系膜細(xì)胞培養(yǎng)后通過(guò)CC K-8檢測(cè)細(xì)胞增殖情況，ELISA檢測(cè)系膜細(xì)胞培養(yǎng)上清液中炎癥細(xì)胞因子TNF-β、IL-6、IL-8、IL-17含量，RT-PCR檢測(cè)大鼠系膜細(xì)胞MBL及 MASP2 mRN A的表達(dá)，蛋白質(zhì)免疫印跡（Western blot）檢測(cè)各組系膜細(xì)胞MBL及MASP2蛋白的表達(dá)。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　1.與對(duì)照組相比較，高糖組系膜細(xì)胞增殖能力增強(qiáng)，MBL可促進(jìn)這一過(guò)程；
　　2.ELISA結(jié)果提示：

4、與對(duì)照組相比較，高糖組大鼠系膜細(xì)胞分泌IL-6、IL-8、I L-17和TNF-β等炎癥因子顯著增多，MBL可加重系膜細(xì)胞這些炎癥因子的分泌。
　　3.RT-PCR結(jié)果提示：與對(duì)照組相比較，高糖組大鼠系膜細(xì)胞MBL及 MASP2 mRNA的表達(dá)顯著增加，雷公藤組系膜細(xì)胞MBL及MASP2 mRNA的表達(dá)較高糖組下降。蛋白質(zhì)免疫印跡結(jié)果提示：與對(duì)照組相比較，高糖組大鼠系膜細(xì)胞MBL及 MASP2蛋白的表達(dá)顯著增加，雷公藤組系膜細(xì)胞M