雷公藤多甙治療炎癥性腸病的基礎(chǔ)研究.pdf

1、目的： 通過對正常對照組、炎癥性腸病（Inflammatory bowel disease，IBD）模型組、雷公藤多甙（Tripterygium wilfordii polyglycosidium，TWP）治療組、奧沙拉嗪鈉治療組各組大鼠腸黏膜損傷的形態(tài)學(xué)評分、HE染色觀察及過氧化物酶體增殖物激活受體γ（Peroxisome proliferator-activated receptorγ，PPARγ）、環(huán)氧化酶2（Cycloo

2、xygenase-2，COX-2）、I-kappaBα（IκBα）及腫瘤壞死因子α（Tumor necrosis factor-α，TN-α）、白介素8（Interleukin-8，IL-8）和細(xì)胞間粘附分子1（Intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1）表達(dá)的測定，觀察TWP對大鼠實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎的療效，并初步探討TWP的治療機(jī)制。 材料與方法： 40只健康成年Wistar大鼠，雄性，

3、體重270士20g，喂標(biāo)準(zhǔn)飼料1周后，隨機(jī)抽取10只作為正常組，標(biāo)準(zhǔn)飼料飲食。余30只大鼠禁食24小時(shí)后給予5％氯氨酮（0.2ml／100g）腹腔內(nèi)注射進(jìn)行麻醉，用約12cm的聚丙烯導(dǎo)管插入肛門約8cm后，將含30mg的三硝基苯磺酸（2，4，6-Trinitrobenzene sulphonic acid，TNBS）的50％乙醇溶液由肛門一次性注入，使動物平躺，自然清醒、標(biāo)準(zhǔn)飼料飲食。造模后第2天30只大鼠隨機(jī)分為3組：模型組、雷公藤多

4、甙組、奧沙拉嗪鈉組，分別進(jìn)行灌胃：50mg／kg雷公藤多甙2ml、40mg／kg奧沙拉嗪鈉2ml、生理鹽水2ml，每日1次，試驗(yàn)期間密切觀察大鼠體重變化、大便情況，2周后取血并處死大鼠，取肛門至回盲部結(jié)腸，冰生理鹽水沖洗，甲醛固定，進(jìn)行損傷評分；酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定TNF-α、IL-8；流式細(xì)胞儀檢測ICAM-1；免疫組化檢測PPARγ、IκBα、COX-2。應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理： 先進(jìn)行正態(tài)分布檢驗(yàn)

5、及方差齊性檢驗(yàn)，各組間比較應(yīng)用方差分析或秩和檢驗(yàn)，兩組間比較應(yīng)用q檢驗(yàn)，指標(biāo)間進(jìn)行相關(guān)分析。 結(jié)果： 與正常組相比，模型組、雷公藤組、奧沙拉嗪鈉組造模后第1天均出現(xiàn)懶動、腹瀉，大便潛血陽性，甚至部分大鼠出現(xiàn)肉眼膿血便，后逐漸拱背、叫聲尖細(xì)、毛色無華變脆、扎堆、胡須下垂，出現(xiàn)脫尾現(xiàn)象，活動、進(jìn)食減少。用藥后上述表現(xiàn)表現(xiàn)較輕。 HE染色顯示正常組大鼠結(jié)腸黏膜光滑無潰瘍，結(jié)構(gòu)清晰，腺體排列整齊。模型組大鼠腸黏膜上皮脫落

6、、破損，腺體不完整，可見組織壞死，大量炎癥細(xì)胞浸潤，充血、水腫明顯，腸壁不同程度增厚。治療組潰瘍區(qū)域明顯縮小，炎癥細(xì)胞減少，肉芽組織顯著增生，上皮脫落減輕。 與正常組相比，模型組腸黏膜損傷評分、血清TNF-α、IL-8、ICAM-1的表達(dá)水平明顯升高，腸道黏膜中PPARγ、IκBα的表達(dá)減少，COX-2表達(dá)明顯增加（P＜0.01）。給予雷公藤多甙和奧沙拉嗪鈉后，兩組血清中TNF-α、IL-8、ICAM-1的水平明顯下降，腸道黏膜

7、表達(dá)PPARγ、IκBα升高，COX-2明顯降低，與模型組有顯著性差異（P＜0.01），兩治療組各指標(biāo)間無顯著性差別。此外TNF-α、IL-8、ICAM-1、COX-2與腸黏膜損傷評分呈正相關(guān)，PPARγ、IκBα表達(dá)與損傷評分呈負(fù)相關(guān)，PPARγ與炎癥介質(zhì)水平呈負(fù)相關(guān)、與IκBα之間呈正相關(guān)（P＜0.05）。 結(jié)論： 1、TNBS誘導(dǎo)的炎癥性腸病腸道黏膜PPARγ表達(dá)減少； 2、TNF-α、IL-8、ICAM-