滌痰湯對動脈粥樣硬化兔模型炎性細胞因子的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、目的：
　　動脈粥樣硬化(AS)是一種主要累及大、中動脈的疾病，其基本病變是動脈內(nèi)膜的脂質(zhì)沉積、內(nèi)膜纖維樣、粥樣斑塊形成引起管壁變硬、管腔狹窄，繼而引起一系列繼發(fā)病變，AS是多種心腦血管疾病的病變基礎。近年來研究發(fā)現(xiàn)，在AS中檢測到炎癥細胞和炎癥介質(zhì)，不論在AS的啟動、病變之進展、還是在血栓性并發(fā)癥形成中，炎癥始終為其關(guān)鍵因素。中醫(yī)學認為AS與痰關(guān)系密切，痰是人體臟腑氣血失和，津液運化失常的病理產(chǎn)物，是一種危害甚廣的致病因素。因此

2、，探索動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展機制成為防治心腦血管病的重中之重。在本研究中，通過對動脈粥樣硬化新西蘭兔模型灌胃滌痰湯水煎液，檢測AS兔主動脈粥樣斑塊的病理組織改變，從細胞以及分子生物水平,研究滌痰湯水煎液對AS兔炎性因子的影響。
　　方法：
　　48只雄性新西蘭白兔按隨機數(shù)字表法，分為6組，每組8只，即空白組、AS模型組、滌痰湯低、中、高劑量組和阿托伐他汀鈣組?？瞻捉M飼以普通飼料；其余各組飼以高脂飼料。8周后，隨機選取AS模型

3、組兔2只，麻醉后，取頸總動脈血，查血脂，提示血脂明顯增高；主動脈分離后制備HE片，血管壁內(nèi)均可見明顯的粥樣斑塊，提示AS造模成功。AS模型組以生理鹽水10ml/kg灌胃4周，期間繼續(xù)喂以高脂飼料；滌痰湯高劑量組給予高濃度中藥煎劑(0.738g/ml)灌胃、滌痰湯中劑量組給予中等濃度中藥煎劑(0.492g/ml)灌胃、滌痰湯低劑量組給予低濃度中藥煎劑(0.266g/ml)灌胃以及阿托伐他汀鈣組應用阿托伐他汀鈣3mg2kg-1d-1灌胃，各

4、組均按10ml/kg灌胃，每日14:00按時灌胃1次，持續(xù)4周，期間繼續(xù)喂以高脂飼料。于末次給藥后禁食(不禁水)12 h，次晨經(jīng)頸總動脈取血4 mL，應用全自動生化分析儀測定血清中Tc、TG、LDL-c、HDL-c、SOD和MDA的含量；ELISA法測定血清中TNF-α、IL-6、ICAM-1、VCAM-1的含量；靜脈注射戊巴比妥鈉(25 mg／kg)后，新西蘭白兔很快進入麻醉期,然后迅速分離心臟到髂總動脈分叉處之間的主動脈，剔除干凈動

5、脈周圍的脂肪組織，并于主動脈弓處取直徑3 mm的組織作HE染色及用Western blot方法作主動脈NF-κB、E-selectin蛋白表達檢測，用熒光定量PCR檢測TNF-α和IL-6mRNA表達及用免疫組化法檢測ICAM-1、VCAM-1表達。
　　結(jié)果：
　　1滌痰湯對動脈粥樣硬化兔模型血清 Tc、TG、HDL-c、LDL-c的影響：滌痰湯能降低AS兔血清 Tc、TG、LDL-c水平，且呈劑量依賴性，與模型組比較，差

6、異具有顯著性（P<0.01或P<0.05）。
　　2滌痰湯對動脈粥樣硬化兔模型血清SOD、MDA的影響：滌痰湯能提高AS兔SOD水平，降低MDA水平，且呈劑量依賴性，與模型組比較，差異具有顯著性（P<0.01或P<0.05）。
　　3滌痰湯對動脈粥樣硬化兔模型血清TNF-α、IL-6、ICAM-1、VCAM-1的影響：滌痰湯能降低AS兔主動脈血清TNF-α、IL-6、ICAM-1、VCAM-1的表達，且呈劑量依賴性，與模型組

7、比較，差異具有顯著性（P<0.01或P<0.05）。
　　4滌痰湯對動脈粥樣硬化兔模型主動脈NF-κB、E-selectin蛋白表達的影響：滌痰湯能降低AS兔主動脈NF-κB和E-selectin蛋白的表達，且呈劑量依賴性，與模型組比較，差異具有顯著性（P<0.01或P<0.05）。
　　5滌痰湯對動脈粥樣硬化兔模型主動脈TNF-α、IL-6 mRNA表達的影響：滌痰湯能降低AS兔主動脈TNF-α、IL-6 mRNA的表達，

8、且呈劑量依賴性，與模型組比較，差異具有顯著性（P<0.01或P<0.05）。
　　6滌痰湯對動脈粥樣硬化兔模型主動脈ICAM-1、VCAM-1的影響：滌痰湯能降低AS兔主動脈ICAM-1、VCAM-1的表達，且呈劑量依賴性，與模型組比較，差異具有顯著性（P<0.01或P<0.05）。
　　7滌痰湯對動脈粥樣硬化兔模型動脈血管組織病理學改變的影響：空白組可見主動脈壁厚薄均勻，內(nèi)膜光滑完整，無AS斑塊形成；AS模型組，內(nèi)膜層隆起

9、，內(nèi)膜下可見大量泡沫細胞聚集和細胞外脂質(zhì)沉積；滌痰湯低劑量組，內(nèi)膜下泡沫細胞聚集和細胞外脂質(zhì)沉積開始有所減少；滌痰湯中劑量組，內(nèi)膜下泡沫細胞聚集和細胞外脂質(zhì)沉積減少比較明顯；滌痰湯高劑量組，內(nèi)膜下泡沫細胞聚集和細胞外脂質(zhì)沉積明顯減少；阿托伐他汀鈣組，內(nèi)膜下泡沫細胞聚集和細胞外脂質(zhì)沉積明顯減少。
　　結(jié)論：
　　1.在本實驗中，應用高脂飼料成功造模了動脈粥樣硬化模型，中醫(yī)的理論認為，“痰”與高脂血癥密切相關(guān)。由此推論，動脈粥樣