TSLC1過表達(dá)對(duì)膀胱癌裸鼠移植瘤的抑制作用研究.pdf

1、目的：
　　研究過表達(dá)肺癌腫瘤抑制因子-1（TSLC1）對(duì)人膀胱癌T24裸鼠移植瘤生長(zhǎng)的抑制作用及相關(guān)分子機(jī)制。
　　方法：
　　將構(gòu)建好的TSLC1過表達(dá)人膀胱癌T24細(xì)胞株（Ad-TSLC1-T24）、空載體對(duì)照T24細(xì)胞株（Ad-T24）及空白對(duì)照T24細(xì)胞株種植于裸鼠皮下，觀察裸鼠移植瘤生長(zhǎng)情況，每5天測(cè)量計(jì)算移植瘤體積一次，并繪制腫瘤的生長(zhǎng)曲線，觀察TSLC1過表達(dá)對(duì)人膀胱癌T24裸鼠移植瘤生長(zhǎng)的影響。種植腫

2、瘤細(xì)胞5周后處死全部裸鼠并留取腫瘤組織標(biāo)本，稱量瘤重并計(jì)算抑瘤率。在光鏡下觀察移植瘤的病理變化，并使用免疫組化檢測(cè)人膀胱癌移植瘤中TSLC1蛋白的表達(dá)情況，并利用Western blot和RT-PCR技術(shù)檢測(cè)裸鼠移植瘤中TSLC1蛋白及mRNA表達(dá)。利用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)移植瘤中Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA的相對(duì)表達(dá)量。利用Western Blot技術(shù)檢測(cè)移植瘤組織中Bcl-2、Bax、Caspase-3的蛋白相對(duì)

3、表達(dá)量，探討TSLC1抑制腫瘤生長(zhǎng)的相關(guān)的分子機(jī)制。
　　結(jié)果：
　　成功構(gòu)建三組腫瘤移植瘤模型，腫瘤生長(zhǎng)曲線顯示Ad-TSLC1-T24組移植瘤生長(zhǎng)明顯慢于Ad-T24組及T24組（P＜0.05），5周后實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，Ad-TSLC1-T24組裸鼠移植瘤體積較Ad-T24組及T24組相比明顯小（P＜0.05），Ad-TSLC1-T24組腫瘤重量明顯低于Ad-T24組及T24組（P＜0.05），三組重量分別是（1.1±0.4）

4、g、(1.8±0.5)g、（2.1±0.9）g，抑瘤率為47.6％，明顯高于Ad-T24組（14%，P＜0.05）。HE染色結(jié)果顯示，TSLC1過表達(dá)組移植瘤細(xì)胞具有明顯的腫瘤細(xì)胞凋亡壞死現(xiàn)象。免疫組化結(jié)果顯示， TSLC1在Ad-TSLC1-T24組移植瘤中表達(dá)呈強(qiáng)陽(yáng)性，在Ad-T24組及T24組中表達(dá)均呈弱陽(yáng)性。Western blot結(jié)果顯示TSLC1蛋白在Ad-TSLC1-T24組的相對(duì)表達(dá)量高于Ad-T24組及T24組， RT

5、-PCR結(jié)果顯示TSLC1 mRNA在Ad-TSLC1-T24組的相對(duì)表達(dá)量高于Ad-T24組及T24組，Ad-T24組及T24組兩組之間TSLC1蛋白及mRNA的表達(dá)均沒有明顯差別。RT-PCR結(jié)果顯示Ad-TSLC1-T24組較Ad-T24組與T24組移植瘤中Bax、Caspase-3 mRNA相對(duì)表達(dá)量增加（P＜0.05），Bcl-2 mRNA相對(duì)表達(dá)量降低（P＜0.05），Ad-T24組與T24組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）

6、。Western Blot結(jié)果顯示Ad-TSLC1-T24組較Ad-T24組與T24組移植瘤中Bax、Caspase-3蛋白相對(duì)表達(dá)量增加（P＜0.05），Bcl-2蛋白相對(duì)表達(dá)量降低（P＜0.05），Ad-T24組與T24組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.TSLC1基因過表達(dá)對(duì)人膀胱癌裸鼠移植瘤的生長(zhǎng)具有明顯的抑制作用。
　　2.TSLC1抑制膀胱癌裸鼠移植瘤的機(jī)制可能與提高Bax/Bcl-2