HIF-1α與吳茱萸堿抑制人結(jié)腸癌LOVO細(xì)胞增殖作用的關(guān)系研究.pdf

1、實驗?zāi)康模?br>　　研究HIF-1α與吳茱萸堿抑制人結(jié)腸癌LOVO細(xì)胞增殖作用的關(guān)系，以及吳茱萸堿調(diào)節(jié)HIF-1α表達(dá)的可能機制。
　　實驗方法：
　　采用結(jié)晶紫染色、流式細(xì)胞術(shù)、報告質(zhì)粒、RT-PCR、WB等實驗技術(shù)，研究吳茱萸堿抑制人結(jié)腸癌LOVO細(xì)胞增殖與HIF-1α關(guān)系，以及吳茱萸堿調(diào)節(jié)HIF-1α表達(dá)的可能分子機制。實驗步驟如下：
　　1、采用結(jié)晶紫染色、FCM、WB等技術(shù)，檢測吳茱萸堿對人結(jié)腸癌LOVO細(xì)

2、胞增殖、凋亡的影響。
　　2、采用報告質(zhì)粒、RT-PCR和WB檢測吳茱萸堿對人結(jié)腸癌LOVO細(xì)胞中HIF-1α影響。
　　3、采用重組腺病毒技術(shù)，檢測HIF-1α過表達(dá)和沉默表達(dá)后，吳茱萸堿對人結(jié)腸癌LOVO細(xì)胞增殖的影響。
　　4、檢測吳茱萸堿對人結(jié)腸癌LOVO細(xì)胞中Akt1/2、p-Akt1/2、IGF-1表達(dá)的影響。利用IGF-1過表達(dá)腺病毒，分析其對結(jié)腸癌細(xì)胞中Akt1/2、p-Akt1/2/表達(dá)的影響。

3、>　　實驗結(jié)果：
　　1、吳茱萸堿抑制人結(jié)腸癌LOVO細(xì)胞增殖，將細(xì)胞阻滯于S期，并誘導(dǎo)其凋亡。
　　2、吳茱萸堿明顯抑制人結(jié)腸癌LOVO細(xì)胞中HIF-1α表達(dá)，并抑制HIF-1α報告質(zhì)?；钚浴?br>　　3、沉默表達(dá)HIF-1α增強吳茱萸堿抑制人結(jié)腸癌LOVO細(xì)胞增殖作用，過表達(dá)HIF-1α減弱吳茱萸堿抑制人結(jié)腸癌LOVO細(xì)胞增殖作用。
　　4、吳茱萸堿能抑制細(xì)胞中p-Akt1/2、IGF-1表達(dá)；外源性過表達(dá)IGF