針刺對創(chuàng)傷性顱腦損傷大鼠TLR2-4-NFκB信號通路的影響.pdf

1、目的：
　　采用 SD大鼠創(chuàng)傷性顱腦損傷模型，探討針刺對 TBI大鼠傷側皮層TLR2/4-NFκB信號通路的調節(jié)作用，以及TLR2/4-NFκB信號通路相關的炎癥細胞因子IL-1β、TNF-α和顱腦損傷標準物S100B表達水平的影響，進一步闡明針刺對創(chuàng)傷性顱腦損傷的調節(jié)機制，為針刺治療TBI提供可靠的臨床研究依據，促進針刺療法的推廣和應用。
　　方法：
　　將108只雄性SD大鼠隨機均分為3組：正常組（不接受其他處理）

2、、模型組（造模完成后不接受針刺治療）、針刺組（造模完成后接受針刺治療）。各組大鼠再依據治療時間的不同，隨機等分為3天組、7天組、14天組三個亞組，每組12只。應用Feeney’s自由落體硬膜外撞擊的方式建立TBI大鼠損傷模型，造模完成后給予針刺治療，應用改良的mNss進行神經行為學評分。通過QPCR法檢測腦組織內TLR2/4-NFκB信號通路基因TLR2、TLR4、NFκB及S100B的表達量，并采用Western blot法檢測TLR

3、2、TLR4、NFκB及S100B蛋白的表達量，酶聯(lián)免疫吸附法檢測傷側皮層炎癥相關細胞因子IL-1β、TNF-α的表達。
　　結果：
　　1. mNSS神經評分結果顯示，針刺治療第7天開始，針刺組較模型組有改善（P<0.05）。
　　2. TBI后模型組TLR2、TLR4、NFκB及S100B基因mRNA相對表達量均較正常高（P<0.05）,且第7天表達量到達最高峰，第14天開始下降。針刺治療第3天TLR2、TLR4基

4、因mRNA相對表達量較模型組高（P<0.05）,而S100B基因mRNA相對表達量較模型組顯著下降（P<0.01）。針刺治療第7天開始，TLR2、TLR4、NFκB基因mRNA相對表達量較模型顯著下調（P<0.01），治療第14天基本下降至正常水平；Western blot結果顯示 TLR2、TLR4、NFκB及S100B基因蛋白的表達水平與mRNA相比，表達趨勢基本相同。
　　3. ELISA結果顯示，IL-1β與TNF-α表達

5、趨勢基本相同。與正常相比，損傷后第3天模型組IL-1β與TNF-α表達量顯著上調（P<0.01）。針刺治療第3天，IL-1β與TNF-α表達量較模型組顯著下降（P<0.01）,針刺治療第7天，針刺組IL-1β與TNF-α表達量基本降至正常水平，而模型組表達量仍高于正常水平（P<0.01）。
　　結論：
　　1.運用成熟的Feeney’s自由落體硬腦膜外撞擊法可以建立損傷程度一致性較好的中度TBI損傷模型。
　　2.針刺