版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、目的:本研究以體外培養(yǎng)的胃癌細(xì)胞MGC803和移植瘤小鼠為研究對象,觀察TLR9在胃癌細(xì)胞和裸鼠移植瘤組織中的表達(dá)。同時,利用TLR9的非特異性抑制劑氯喹(chloroquine,CQ)對TLR9/NF-κB信號通路進(jìn)行干預(yù),觀察TLR9/NF-κB信號通路在胃癌細(xì)胞MGC803增殖、遷移以及對IL-6分泌的影響,以及與胃癌發(fā)生發(fā)展和轉(zhuǎn)移相關(guān)的細(xì)胞因子:基質(zhì)金屬蛋白酶(matrixmetalloproteinase,MMP)和環(huán)氧合酶-
2、2(cyclo-oxygenase-2,COX-2)mRNA表達(dá)情況,探討TLR9的表達(dá)及其介導(dǎo)的NF-κB信號通路在胃癌發(fā)生及進(jìn)展中的作用機(jī)制,為胃癌建立新的、有效的臨床免疫治療提供理論和實驗依據(jù)。
方法:(1)體外培養(yǎng)胃癌細(xì)胞MGC803,免疫熒光法檢測TLR9在胃癌細(xì)胞MGC803中的表達(dá)。(2)CCK-8法測定TLR9抑制劑CQ對MGC803細(xì)胞增殖活性的影響。(3)ELISA方法觀察TLR9抑制劑CQ在不同時間段對M
3、GC803細(xì)胞釋放IL-6的影響。(4)采用細(xì)胞劃痕法檢測TLR9抑制劑CQ對MGC803細(xì)胞遷移能力的影響。(5)運用RT-PCR的方法檢測不同濃度TLR9抑制劑CQ作用胃癌細(xì)胞MGC803一段時間后對COX-2,MMP-2,MMP-7以及NF-κBp65mRNA表達(dá)的影響。(6)建立胃癌的移植瘤裸鼠模型,觀察TLR9抑制劑CQ對腫瘤大小及腫瘤轉(zhuǎn)移的影響。(7)解剖移植瘤裸鼠脾臟與腫瘤組織,計算裸鼠的脾指數(shù),觀察免疫系統(tǒng)的變化。(8)
4、應(yīng)用免疫組化的方法觀察TLR9抑制劑CQ對腫瘤組織TLR9的表達(dá)及組織結(jié)構(gòu)的影響。
結(jié)果:(1)胃癌細(xì)胞MGC803上有TLR9的表達(dá),并且主要表達(dá)在細(xì)胞漿。(2)50μg·mL-1、100μg·mL-1、200μg·mL-1的CQ均能抑制胃癌細(xì)胞MGC803的增殖,且呈時間和濃度依賴性(p<0.05)。(3)200μg·mL-1的CQ分別作用MGC803細(xì)胞24h,48h和72h后均可抑制IL-6的表達(dá),而50μg·mL-1
5、和100μg·mL-1的CQ僅在作用MGC803細(xì)胞72h后方可抑制IL-6的表達(dá),且差異具有顯著性(p<0.05)。(4)TLR9/NF-κB信號通路激動劑CpGODN能夠促進(jìn)胃癌細(xì)胞MGC803的遷移(p<0.05),抑制劑CQ能夠抑制胃癌細(xì)胞MGC803的遷移,并且呈時間-濃度依賴性(p<0.05)。(5)TLR9/NF-κB信號通路激動劑CpGODN能夠促進(jìn)胃癌細(xì)胞MGC803表達(dá)NF-κBp65mRNA,COX-2mRNA和M
6、MP-2mRNA,而抑制劑CQ能夠抑制此三者mRNA的表達(dá),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。對于MMP-7mRNA來說,TLR9/NF-κB信號通路激動劑和中低濃度的抑制劑能夠促進(jìn)mRNA的表達(dá),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05);而高濃度的抑制劑對mRNA的表達(dá)與對照組相比沒有統(tǒng)計學(xué)意義。(6)在早期將TLR9/NF-κB信號通路抑制后可以抑制腫瘤的增長,而晚期則不能抑制腫瘤的增長;解剖移植瘤裸鼠后在癌細(xì)胞種植部位附近的淋巴結(jié)、肝、脾
7、中均未觀察到有癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移灶。(7)SP法檢測結(jié)果顯示TLR9/NF-κB信號通路的激動劑組和空白模型組的腫瘤組織中表達(dá)TLR9的陽性細(xì)胞數(shù)要高于抑制劑組,且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05),且激動劑組和空白模型組均可見明顯的壞死灶,而抑制劑組壞死灶要相對較小。
結(jié)論:(1)胃癌細(xì)胞MGC803表達(dá)TLR9。(2)TLR9/NF-κB信號通路參與了胃癌細(xì)胞的增殖與轉(zhuǎn)移。(3)抑制TLR9/NF-?B信號通路可能是胃癌免疫治療的
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- TLR9-NF-κB信號通路在胃癌組織中的表達(dá)及其臨床意義.pdf
- 七氟烷預(yù)處理對體外循環(huán)大鼠腦TLR9-NF-κB信號通路的影響.pdf
- 模擬運輸應(yīng)激對大鼠肺臟免疫機(jī)能及TLR4-NF-κB信號通路的影響.pdf
- 針刺對創(chuàng)傷性顱腦損傷大鼠TLR2-4-NFκB信號通路的影響.pdf
- 西格列汀對NOD小鼠胰島炎及TLR4-NF-κB信號通路的影響.pdf
- 青藤堿對小鼠巨噬細(xì)胞TLR4-NF-κB信號通路作用的研究.pdf
- PI3K-NF-κB信號傳導(dǎo)通路阻斷對胃癌SGC7901細(xì)胞的影響.pdf
- PRRSV體外感染PAMs對TLR3-NF-κB信號通路的分子作用機(jī)制.pdf
- 降糖三黃片對糖尿病腎病大鼠TLR4-NF-κB信號通路的研究.pdf
- 三葉香茶菜對肝纖維化大鼠TLR4-NF-κB信號傳導(dǎo)通路的影響.pdf
- TLR-NF-κB信號通路與其負(fù)性調(diào)控因子SIGIRR和IBD的關(guān)系.pdf
- TLR2-NF-κB信號通路在皮膚GVHD發(fā)病機(jī)制中的實驗研究.pdf
- 亞低溫對LPS介導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞TLR4-NF-kappaB信號通路的影響.pdf
- 大腸桿菌感染對仔兔小腸氧化還原狀態(tài)及TLR4-NF-κB信號通路的影響.pdf
- 脂氧素對鼠源性巨噬細(xì)胞內(nèi)TLR4-NF-κB信號通路的影響及其作用機(jī)制.pdf
- rhIFN-α1b對RSV感染鼠肺病變及JAK-STAT和TLR4-NF-κB信號通路的影響.pdf
- NF-κB-POU2F2-SLIT2-ROBO1信號通路在胃癌轉(zhuǎn)移中的作用研究.pdf
- 干預(yù)NF-κB信號通路對腦星形膠質(zhì)細(xì)胞死亡的影響研究.pdf
- 白芍總苷抑制口腔扁平苔蘚TLR4-NF-κB信號通路的激活.pdf
- 芷辛方治療癌痛及TLr-NF-kappa B信號通路的機(jī)制研究.pdf
評論
0/150
提交評論