雙酚A對稀有鮈鯽雌性親本胚胎及子代骨骼發(fā)育的影響.pdf

1、雙酚A(BPA)是一種重要的工業(yè)原料，廣泛存在于日常生活的各種物品中。由于BPA具有內(nèi)源性雌激素(E2)類似的結(jié)構(gòu)，可以模擬E2作用，干擾機(jī)體的正常內(nèi)分泌系統(tǒng)。近年來，越來越多的研究表明BPA會對哺乳動物骨骼的發(fā)育造成影響。水體中匯集著各種來源的BPA，魚類終身生活在水環(huán)境中。BPA是否會引起魚類骨骼發(fā)育異常，目前尚無報道。因此本研究以稀有鮈鯽為研究模型，探究BPA對魚類骨骼發(fā)育的影響及分子機(jī)制。首先雌性親魚暴露于15、225μg/L的

2、水體21d，與正常雄性稀有鮈鯽交配，產(chǎn)生子代。通過分析胚胎受精率、死亡率、孵化率、畸形率、心率、自主運(yùn)動和仔稚魚體長探究BPA暴露對稀有鮈鯽胚胎發(fā)育的影響;通過軟骨染色觀察稀有鮈鯽仔稚魚頭部軟骨發(fā)育狀況;使用實時熒光定量PCR檢測仔稚魚全魚組織中軟骨發(fā)育相關(guān)的基因骨形成蛋白2(Bone morphogenetic proteins2，bmp2)、bmp4、bmp6、高泳動家族性別決定基因9(SRY-related high mobili

3、ty group-box gene9，sox9)、成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子（Runt-related transcription factor2，runx2）、Ⅱ型膠原α1(Collagen typeⅡalpha1，col2α1和賴氨酸氧化酶(1ysyl oxidase1，lox1)的表達(dá)探究BPA對稀有鮈鯽軟骨發(fā)育的影響;以及通過檢測稀有鮈鯽仔稚魚全魚組織中軟骨形成關(guān)鍵酶-賴氨酸氧化酶的活性研究BPA的暴露對軟骨形成的影響。主要研究結(jié)果如下

4、:
　　(1)在15μg/L和225μg/L BPA作用下，稀有鮈鯽胚胎的受精率和孵化率降低，死亡率和畸形率增加，心率顯著加快，自主運(yùn)動能力下降，仔稚魚的生長減慢。說明BPA的處理顯著抑制稀有鮈鯽胚胎的發(fā)育，并且可能會對稀有鮈鯽產(chǎn)生神經(jīng)毒性。
　　(2)225μg/L處理組中稀有鮈鯽個體出現(xiàn)角舌骨和下頜骨縮短，且15μg/L和225μg/L的BPA處理軟骨內(nèi)骨化時間均被延長。說明BPA暴露會抑制稀有鮈鯽頭部軟骨發(fā)育。

5、　　(3))在15μg/L和225μg/L BPA作用下，調(diào)控軟骨細(xì)胞增殖的sox9a基因及編碼軟骨關(guān)鍵成分-膠原蛋白的col2α1基因表達(dá)顯著下降，并且軟骨細(xì)胞增殖分化和膨大相關(guān)基因bmp2、bmp4和runx2、bmp6表達(dá)量也被顯著抑制。因此，BPA可能是通過抑制軟骨細(xì)胞的增殖和膨大相關(guān)基因的表達(dá)抑制軟骨的形成以及骨化。
　　(4)軟骨形成的最關(guān)鍵的酶LOX的活性在BPA處理下呈劑量依賴型下調(diào)，說明軟骨形成的過程也受到BPA