前列地爾對膿毒癥外周血內(nèi)皮細(xì)胞微粒的影響及意義.pdf

1、目的:目前膿毒癥(sepsis)和感染性休克(septic shock)已成為重癥監(jiān)護(hù)病房內(nèi)非心臟病人死亡的最主要原因。膿毒癥的臨床特征主要表現(xiàn)為系統(tǒng)性炎性反應(yīng)綜合征（The Systemic Inflammatory Response Syndrome，SIRS）與多器官功能障礙(MultipleOrgan Dysfunction Syndrome，MODS)。在膿毒癥的病理生理過程中，內(nèi)皮損傷是導(dǎo)致SIRS和MODS的重要原因。內(nèi)皮

2、細(xì)胞在激活或凋亡狀態(tài)下釋放出微小的膜性小粒，即內(nèi)皮細(xì)胞微粒(endothelial microparticles，EMPs)，EMPs水平可用于評價(jià)內(nèi)皮功能障礙情況，膿毒癥的發(fā)生與內(nèi)皮功能障礙密切相關(guān)，其發(fā)展過程中涉及了EMPs的作用。前列地爾具有擴(kuò)張血管、抑制血小板聚集、細(xì)胞保護(hù)、抗炎、改善微循環(huán)、以及保護(hù)血管內(nèi)皮的作用。前列地爾是否對膿毒癥起改善作用、是否影響EMPs水平有待研究。本實(shí)驗(yàn)采用盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)(Cecal ligatio

3、n and puncture，CLP)建立膿毒癥大鼠模型，給予不同劑量前列地爾，動(dòng)態(tài)觀察大鼠血漿內(nèi)皮細(xì)胞微粒(EMPs)水平，通過膿毒癥大鼠內(nèi)皮細(xì)胞微粒的變化情況及其趨勢，探討前列地爾是否影響EMPs水平，及EMPs水平與膿毒癥嚴(yán)重程度的相關(guān)性，為臨床應(yīng)用前列地爾治療膿毒癥及分析內(nèi)皮功能障礙情況，為闡明膿毒癥的發(fā)病機(jī)制、判斷預(yù)后及評價(jià)療效提供新的參考。
　　方法:180g-220g雄性SD大鼠100只隨機(jī)分為5組，分別為假手術(shù)組（

4、Sham組）、盲腸結(jié)扎穿刺組（CLP組）、盲腸結(jié)扎穿刺低劑量前列地爾給藥組（CLP+PGE1-1組）、盲腸結(jié)扎穿刺中劑量前列地爾給藥組(CLP+PGE1-2組)、盲腸結(jié)扎穿刺高劑量前列地爾給藥組（CLP+PGE1-3組）。采用盲腸結(jié)扎穿刺法(CLP)建立膿毒癥模型，CLP+PGE1-1組、CLP+PGE1-2組、CLP+ PGE1-3組術(shù)前30分鐘分別以前列地爾(PGE12ml-10ug)注射液，加入10ml生理鹽水，按低、中、高劑量分

5、別以1.5ug、3.0ug、6.0ug腹腔注射，并在術(shù)中25min時(shí)分別注射0.5ug、1.0ug、2.0ug，各組總劑量分別為0.25、0.5、1.0ug。假手術(shù)組（Sham組）和盲腸結(jié)扎穿刺組（CLP組）分別注射同低劑量組同等質(zhì)量的生理鹽水。各組分別在術(shù)后0、6、12、24小時(shí)各取5只大鼠腹主動(dòng)脈取血，分離血漿檢測EMPs的百分比、TNF-α的濃度，采用SPSS-20.0軟件對資料進(jìn)行方差分析測樣本均數(shù)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)

6、意義，觀察各組大鼠一般狀態(tài)并應(yīng)用H&E染色檢測腎臟病理組織學(xué)變化。
　　結(jié)果:0小時(shí)CLP組與Sham組血清TNF-α水平濃比較無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)CLP組與Sham之間的TNF-α水平有顯著地升高，表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。0 h CLP+PGE1組與Sham組之間血清TNF-α濃度比較無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。組間對比CLP+PGE1組與Sham組的6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)血清TNF-

7、a升高，提示具有統(tǒng)計(jì)學(xué)的差異(P＜0.05)。0h小時(shí)CLP+PGE1組與CLP組之間血清TNF-α濃度比較無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。在6小時(shí)、12小時(shí)及24小時(shí)血清TNF-α濃度比較，CLP+PGE1組血清TNF-α濃度升高的水平較CLP組明顯降低，有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。不同劑量的前列地爾組，相同時(shí)間點(diǎn)各組之間血清TNF-α濃度隨給藥劑量增加升高趨勢逐漸下降。0小時(shí)CLP組與Sham組之間EMPs比較無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差

8、異(P＞0.05)，6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)CLP組與Sham之間EMPs水平比較有明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。0小時(shí)CLP+PGE1組與Sham組之間EMPs比較無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。CLP+PGE1組與Sham組之間6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)EMPs有升高，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。0小時(shí)CLP+PGE1組與CLP組之間EMPs無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。CLP+PGE1組與CLP組之間，在6h

9、、12h及24h EMPs比較，CLP+PGE1組EMPs水平較CLP組明顯降低，有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。不同劑量的前列地爾組，相同時(shí)間點(diǎn)各組之間血清EMPs水平隨給藥劑量增加升高趨勢逐漸下降。膿毒癥大鼠6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)病情逐漸加重，急性腎損傷情況加重。CLP組大鼠正常腎結(jié)構(gòu)被破壞。CLP+PGE1組大鼠的腎損傷程度減輕，前列地爾應(yīng)用高劑量組大鼠肝組織鏡下顯示腎小球少量纖維組織增生，伴有少量炎性細(xì)胞浸潤，以淋巴細(xì)胞為