鱉甲煎丸調(diào)控HepG2細胞增殖、黏附、侵襲及Wnt-β-catenin信號通路中相關(guān)蛋白表達的實驗研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2 0 1 2 級碩士學(xué)位論文鱉甲煎丸調(diào)控H e p G 2 細胞增殖、黏附、侵襲及W n t ／[ 3 - c a t e n i n信號通路中相關(guān)蛋白表達的實驗研究T h e R e g u l a t o r y e f f e c to f B i e j i a j i a n P i l lo n P r o l i f e r a t i o n ，A d h e s i o n ，I n v a s i o

2、na n d R e l a t e d P r o t e i n i nW n t ／l j —c a t e n i nS i g n a l i n g P a t h w a y o nH e p G 2課題來源： 國家自然科學(xué)基金( 8 1 0 7 2 9 3 4 ，3 3 萬)學(xué)位申請人導(dǎo) 師 姓 名專 業(yè) 名 稱培 養(yǎng) 類 型培 養(yǎng) 層 次所 在 學(xué) 院答辯委員會主席答辯委員會委員賈文燕賀松其教授中西醫(yī)結(jié)合基礎(chǔ)學(xué)術(shù)型碩士

3、研究生中醫(yī)藥學(xué)院周福生教授周迎春教授徐國良教授張國華教授張緒富教授2 0 15 年5 月1 6 日 廣州摘要外運用血清藥理學(xué)方法能夠有效地評估中草藥的藥理作用。近年來，很多的中藥處方，例如保肝寧、小續(xù)命湯和大黃蟄蟲丸都采用這種方法進行研究。本研究將采用血清藥理學(xué)方法探討鱉甲煎丸抗肝癌的作用機制。W n t ／1 3 ．c m e m n 信號通路與腫瘤的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切，是腫瘤分子生物學(xué)領(lǐng)域研究的熱點，大量實驗表明W n t ／1 3

4、．c a t e n i n 信號通路同肝癌細胞增殖、轉(zhuǎn)移、黏附侵襲有關(guān)。W n t ／1 3 ．c a t e n i n 信號通路由細胞外因子W n t 、跨膜受體、p ．連環(huán)蛋白( 1 3 - c a t e n i n ) 、A P C ／A x i n ／G S K ．3 D “降解復(fù)合物”以及轉(zhuǎn)錄因子T 細胞因子( T C F )等組成，其中跨膜受體由卷曲蛋白受體( F Z D ) 家族成員、低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白( L

5、R P ) 家族的成員組成。W n t ／1 3 ．c m e m n 信號通路只有在F Z D 和L R P 均與W n t 結(jié)合后才能激活，通過1 3 - c a t e n i n 入核調(diào)節(jié)T C F 家族的D N A 結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控細胞的行為。沒有W n t 信號刺激的情況下，胞質(zhì)內(nèi)的1 3 - c a t e n i n 被A P C 、A x i n 、G S K ．3 B 組成的復(fù)合物磷酸化而降解，從而維持細胞質(zhì)內(nèi)p

6、 - c m e m n的低水平狀態(tài)。有W n t 信號刺激的情況下，細胞分泌的W n t 蛋白與細胞表面受體F Z D 和L R P 5 ／6 結(jié)合后，觸發(fā)細胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)；細胞內(nèi)蛋白D s h 被活化，繼而活化的D s h 與A x i n 及F r a t l 相結(jié)合，后兩者與G S K ．3 6 和A P C 形成復(fù)合物，F(xiàn) r a t l 介導(dǎo)G S K ．3 D 從A x i n 上脫離，導(dǎo)致A x i n 連接G S K

7、．3 D 的復(fù)合物陷入無功能狀態(tài)，不能磷酸化1 3 - c a t e n i n 。最終沒有磷酸化的p - c m e m n 不能被降解，在細胞內(nèi)積累并轉(zhuǎn)移到細胞核內(nèi)，入核后與轉(zhuǎn)錄因子T C F ／L E F 相結(jié)合，協(xié)同激活靶基因c ．m y c 、c y c l i n D l 、C O X ．2 、C D 4 4 、V E G F 、M M P ．2 和M M P ．9 等的轉(zhuǎn)錄，促進肝癌的發(fā)生和侵襲轉(zhuǎn)移。W n t ／p ．

8、c m e m n 信號通路與癌細胞增殖、調(diào)控細胞周期有關(guān)。細胞周期可分為四個階段：G 1 期( D N A 合成前期) 、S 期( D N A 合成期) 、G 2 期( D N A合成后期) 、M 期( 有絲分裂期) ，有G 1 期關(guān)鍵點和G 2 期關(guān)鍵點。G l 期關(guān)鍵點決定了細胞能否通過G 1 期進入S 期，它是細胞周期的始動機制；G 2 期關(guān)鍵點決定細胞能否進行G 2 期向M 期的轉(zhuǎn)變，涉及到細胞的有絲分裂。c y c l i