子癇前期患者胎盤(pán)中KLF-8的研究.pdf

1、目的：子癇前期（Preeclampsia，PE）是一種妊娠期所特有的嚴(yán)重的全身性疾病，在妊娠前血壓正常，妊娠20周后出現(xiàn)全身小動(dòng)脈痙攣,病情進(jìn)一步加重可發(fā)展為子癇，進(jìn)一步導(dǎo)致多臟器的功能衰竭，嚴(yán)重威脅母嬰的安全,是我國(guó)孕產(chǎn)婦和圍產(chǎn)兒死亡的重要病因之一[1,2]。目前，子癇前期并沒(méi)有一元論的病因和發(fā)病機(jī)制，根據(jù)不斷的研究總結(jié)出了子癇前期的發(fā)病機(jī)制與滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲能力異常、氧化應(yīng)激和抗血管生成反應(yīng)變化等關(guān)系密切，其中以滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲能力異常備受

2、矚目及認(rèn)可。KLF-8是人們新近研究發(fā)現(xiàn)的可以影響滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲能力進(jìn)而引發(fā)子癇前期發(fā)生的一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子，本文通過(guò)檢測(cè)早發(fā)型和晚發(fā)型重度子癇前期孕婦與健康孕婦的胎盤(pán)組織中KLF-8的變化，探討KLF-8與子癇前期發(fā)病的關(guān)系。
　　方法：
　　1研究對(duì)象
　　選取2015年9月至2016年03月在武安市第一人民醫(yī)院以剖宮產(chǎn)術(shù)分娩的重度子癇前期孕婦40例，其中早發(fā)型重度子癇前期孕婦20例（發(fā)病孕周<34周），晚發(fā)型重度子癇前期

3、孕婦20例（發(fā)病孕周≥34周），對(duì)照組選擇行擇期剖宮產(chǎn)術(shù)分娩的同期孕足月健康孕婦20例。所有研究對(duì)象均選擇頭胎、單胎、胎兒無(wú)畸形而且孕婦既往均無(wú)高血壓、心臟病、糖尿病、腎臟病及甲狀腺功能亢進(jìn)、貧血及自身免疫性疾病等病史，無(wú)吸煙及嗜酒史，無(wú)長(zhǎng)期服用藥物史。入院時(shí)查肝腎功能及凝血功能正常，詳細(xì)記錄患者的年齡、月經(jīng)史、生育史及家族史等資料。三組孕婦的例數(shù)、年齡、孕產(chǎn)次、吸煙及嗜酒比較，均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。
　　2標(biāo)本采集

4、r>　　所有研究對(duì)象均在本人簽署知情同意書(shū)后進(jìn)行標(biāo)本采集，胎盤(pán)組織娩出20min內(nèi)采取除外肉眼所見(jiàn)的病變區(qū)面積約1cm×1cm×1cm的3塊母體面胎盤(pán)組織，用磷酸鹽緩沖液（PBS）反復(fù)漂洗，一塊用4％多聚甲醛中固定，另外2塊放入液態(tài)氮中存于滅菌滅酶凍存管中后都放入-80℃冰箱中凍存待后測(cè)定。胎盤(pán)組織的KLF-8蛋白表達(dá)部位選用免疫組化SP法檢測(cè)， KLF-8mRNA的表達(dá)水平應(yīng)用熒光定量PCR檢測(cè), KLF-8蛋白的表達(dá)應(yīng)用蛋白印跡法檢

5、測(cè)。
　　3運(yùn)用SPSS21.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布，結(jié)果采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，以P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1一般特征
　　早發(fā)型重度子癇前期患者組的平均年齡是26.60±0.91歲，年齡分布在26~40歲；晚發(fā)型組的平均年齡為23.90±0.62歲，年齡分布在23~33歲，對(duì)照組平均年齡為24.48±0.71歲，年齡分布在22~34歲，三組之

6、間年齡無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。三組患者均為G1P1，均無(wú)吸煙及嗜酒史。見(jiàn)Table1。
　　2三組孕婦胎盤(pán)組織中KLF-8蛋白的表達(dá)部位
　　三組胎盤(pán)組織中均可見(jiàn)到棕褐色陽(yáng)性染色細(xì)胞，證明KLF-8蛋白主要表達(dá)于胎盤(pán)合體滋養(yǎng)細(xì)胞的胞核和胞質(zhì)中。
　　3三組孕婦胎盤(pán)組織中KLF-8 mRNA表達(dá)水平的比較
　　早發(fā)型重度子癇前期胎盤(pán)組織中KLF-8 mRNA水平為0.65±0.07，晚發(fā)型組為0.96±0.0

7、9，對(duì)照組為0.98±0.06。早發(fā)型重度子癇前期胎盤(pán)組織中KLF-8 mRNA水平明顯低于晚發(fā)型組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）；而晚發(fā)型組與對(duì)照組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。見(jiàn)Table2、Table3。
　　4三組孕婦胎盤(pán)組織中KLF-8蛋白表達(dá)水平的比較
　　三組胎盤(pán)組織中均可檢測(cè)到KLF-8蛋白的表達(dá)，早發(fā)型重度子癇前期組 KLF-8蛋白水平為0.61±0.05，晚發(fā)型為0.95±0.06，對(duì)照組為0.98±

8、0.07。早發(fā)型子癇前期組明顯低于晚發(fā)型子癇前期組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；而晚發(fā)型組與對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。見(jiàn)Table4、Table5。
　　結(jié)論：本研究結(jié)果提示早發(fā)型重度子癇前期孕婦胎盤(pán)組織中KLF-8蛋白和mRNA表達(dá)水平明顯低于晚發(fā)型組，而晚發(fā)型組與對(duì)照組間無(wú)明顯差異，說(shuō)明早發(fā)型重度子癇前期與晚發(fā)型的發(fā)病機(jī)制不同，胎盤(pán)組織中KLF-8蛋白和mRNA表達(dá)的減少，影響了子宮螺旋動(dòng)脈重鑄和滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲力