高血糖性的短暫性全腦缺血對(duì)癲癇及自噬作用的研究.pdf

1、目的：腦卒中（中風(fēng)）是癲癇的一個(gè)重要誘因，而高血糖后的腦卒中會(huì)顯著增加癲癇的發(fā)生率。有報(bào)道顯示缺血性腦卒中誘導(dǎo)自噬增強(qiáng)，而高血糖性腦卒中所誘導(dǎo)的癲癇是否會(huì)大大增加自噬尚未清楚。本研究的目的是要揭示高血糖性腦卒中誘導(dǎo)的癲癇與自噬的關(guān)系，為可以通過干預(yù)自噬來控制癲癇的發(fā)作的深入研究提供前期理論基礎(chǔ)。
　　方法：大鼠分為4組，正常組，短暫性全腦缺血組，高血糖組（腹腔注射鏈脲佐菌素（streptozocin，STZ），高血糖+短暫性全腦缺

2、血組。注射STZ后檢測(cè)大鼠的飲水量、體重以及血糖濃度的改變情況，缺血后統(tǒng)計(jì)癲癇的發(fā)作率。用蘇木素伊紅（H&E）染色的方法比較四個(gè)組之間細(xì)胞損傷狀況，用免疫印跡反應(yīng)（Western blot）和免疫組化來檢測(cè)不同組別之間自噬體標(biāo)記物（LC3B）、自噬基底物（P62）和溶酶體膜功能標(biāo)記物（LAMP1）的變化情況；用免疫熒光雙標(biāo)LC3B與NeuN、GFAP檢測(cè)自噬變化的主要細(xì)胞類型。
　　結(jié)果：注射STZ后，大鼠的血糖增高約4倍，并伴隨

3、明顯的體重下降和大量的水的攝入；高血糖的大鼠在短暫性全腦缺血后引起100％的癲癇發(fā)作率。H&E染色結(jié)果顯示在早期癲癇發(fā)生時(shí)尚未發(fā)現(xiàn)皮質(zhì)和海馬神經(jīng)元的死亡。Western blot顯示短暫性全腦缺血組LC3B表達(dá)量增加約2倍，而高血糖+短暫性全腦缺血組增加約6倍。免疫組化的結(jié)果與western blot有相似的變化趨勢(shì)。而P62和LAMP1的表達(dá)量在缺血組和高血糖缺血組輕度增加。免疫熒光雙標(biāo)結(jié)果表明LC3B主要與NeuN共定位，提示自噬的