阿魏酸鈉聯(lián)合冰片灌胃對小鼠短暫性全腦缺血的神經(jīng)保護(hù)作用.pdf

1、腦血管疾病是危害人類生命與健康的常見病和多發(fā)病，而缺血性腦血管病占全部腦血管病的60-80％，并容易誘發(fā)血管性癡呆。近幾年治療缺血性腦血管病藥物不斷問世，但療效并不令人滿意，且有些藥物毒副作用大。因此，研發(fā)抗腦缺血性藥物具有重要的社會(huì)意義。 阿魏酸鈉(Sodium Ferulate，SF)對缺血性腦損傷有保護(hù)作用。但其脂溶性低，透過血腦屏障(blood brain barrier，BBB)進(jìn)入腦區(qū)的濃度較低。天然冰片主成分是龍腦

2、(borneol，B)，能促進(jìn)多種中樞神經(jīng)藥物透過BBB，具“獨(dú)行則勢弱，佐使則有功”特點(diǎn)。SF和B均為神經(jīng)保護(hù)活性成分，價(jià)廉易得且來源廣泛，所以本實(shí)驗(yàn)首次探討SF聯(lián)合B抗小鼠腦缺血作用，為開發(fā)一種高效低廉的抗腦缺血藥物提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 目的：探討B(tài)能否提高SF的生物利用度，兩藥聯(lián)合灌胃能否對短暫性全腦缺血小鼠協(xié)同發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。 材料與方法：(1) 采用高效液相色譜法(high pressure liquid clar

3、omatography，HPLC)和伊文氏藍(lán) (Evan’s blue，EB)法考察劑量因素及B對SF在小鼠血漿和腦區(qū)藥物代謝動(dòng)力學(xué)的影響，從而確定B與SF的理想劑量。(2)采用C57BL/6J 小鼠央閉雙側(cè)頸總動(dòng)脈30 min為短暫性全腦缺血模型。(3)實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分為10組(假手術(shù)組，模型組，陽性藥物組，陽性藥物假手術(shù)組，SF低、高劑量組，B組，復(fù)合藥物低、中、高劑量組)。陽性藥為0.5g/kg腦復(fù)康；SF組劑量分別為100 mg/kg

4、和400 mg/kg；B組劑量為2 mg/kg；復(fù)合藥物低、中、高劑量組為2 mg/kg的B分別復(fù)合100 mg/kg、200 mg/kg和400mg/kg SF。造模前 30 min 給藥1次，再灌后5 min再給藥1次。術(shù)后觀察死亡率、癲癇率及神經(jīng)功能評(píng)分。術(shù)后第4天做水迷宮實(shí)驗(yàn)。(4)實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分為7組(假手術(shù)組，模型組，陽性藥物組，SF低、高劑量組，B組，復(fù)合藥物低劑量組)。術(shù)后1 h檢測血漿與腦區(qū)中超氧化歧化酶(superoxi

5、de dismutase，SOD)活性與丙二醛(malondialdehyde，MDA) 含量。(5)實(shí)驗(yàn)分組同(4)，術(shù)后24 h做TTC染色、腦含水量測定。(6)實(shí)驗(yàn)分組同(4)，術(shù)后17 h尾iv EB，考察BBB的丌放情況；(7) 實(shí)驗(yàn)分組同 (4)，術(shù)后3天做蘇木精-伊紅 (Hematoxylin-Eosin，HE) 染色與神經(jīng)膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein，GFAP)標(biāo)記的

6、免疫組化。 結(jié)果：(1) HPLC結(jié)果顯示SF劑量增加10倍(0.2 g 到 2.0 g)，海馬中SF濃度沒有相應(yīng)增加；復(fù)合B(2 mg/kg)后SF在海馬的Cmax與 AUC<,0-30>均增加 1.4 倍。(2) 癲癇率和神經(jīng)功能評(píng)分顯示，復(fù)合藥物能減輕腦缺血損傷(P<0.05)。(3)水迷宮實(shí)驗(yàn)中模型組潛伏期明顯大于假手術(shù)組(P<0.05)，復(fù)合藥物組潛伏期明顯縮短(P<0.05)，表明復(fù)合藥物改善腦缺血小鼠學(xué)習(xí)記憶能力。

7、(4)SOD與MDA結(jié)果顯示，復(fù)合藥物能減輕小鼠腦自由基損傷(P<0.05)。(5)腦含水量與EB實(shí)驗(yàn)中復(fù)合藥物能減輕腦缺血引起的血管通透性增加(P<0.05)，減輕腦水腫。(6)HE染色與GFAP標(biāo)記的免疫組化結(jié)果顯示復(fù)合藥物減少腦缺血小鼠CA1區(qū)的神經(jīng)元死亡和抑制膠質(zhì)細(xì)胞的激活。 結(jié)論：(1) 單純加大SF的劑量不能提高其在腦中的濃度； (2)B可提高SF在腦內(nèi)(特別是海馬)的生物利用度； (3)SF復(fù)合B能改善短暫性全腦缺