新型NNRTIs二芳基苯胺類和HIV成熟抑制劑Bevirimat雙靶點化合物的設計、合成、生物活性及體外代謝評價.pdf

1、艾滋病（AIDS）是由人類免疫缺陷病毒（HIV）感染引起的疾病，也是當前醫(yī)學界難以治愈的頑疾之一。2016年全球艾滋病統計數據估計，2015年有3670萬人感染艾滋病毒。其中，200萬人是新增感染者，110萬人死于與艾滋病有關的疾病。盡管針對病毒生命的不同階段進行抑制的被批準上市的藥物已有30多種，但還沒有徹底治愈 HIV感染的療法。臨床上使用的高效抗逆轉錄病毒療法能有效緩解患者的病情，極大的降低患者體內的病毒載量，延長患者壽命，但該療

2、法并不能從根源上將患者體內的HIV病毒清除，還存在明顯毒副作用，患者依從性較差，研究新型抗 HIV藥物為臨床提供安全，經濟用藥選擇變得尤為重要。本課題組前期研究發(fā)現兩類新結構類型的非核苷類逆轉錄酶抑制劑（NNRTIs）先導化合物：二芳基吡啶胺類（DAPAs）和二芳基苯胺類（DAANs）化合物，它們對 HIV野生型和多種耐藥型病毒均有較強抑制活性，與同類上市藥Riplivirine的活性相當，并能有效抑制其新生耐藥性病毒的復制。
　

3、　Bevirimat（BVM，3-O-(3′,3′-dimethylsuccinyl)betulinic acid）是第一個進入臨床試驗的成熟抑制劑。它干擾了CA-SP1（capsid-spacer protein1）到CA（capsid）的加工，導致 CA-SP1的積累并組裝釋放未成熟的 HIV病毒，此病毒不具有感染能力，從而阻斷了HIV病毒的傳播。已通過IIa期臨床試驗，證明了其臨床療效和安全性。
　　作為持續(xù)性研究，本課題意

4、將高活性的二芳基苯胺類化合物與 bevirimat經適當的中間體連接，合成雙靶點化合物，再對其進行活性以及體外代謝性能的考察。以期發(fā)現高活性、體內易代謝分離、可同時作用于不同靶點的雙靶點新型化合物，發(fā)揮1+1>2的協同抗HIV的作用和克服HIV藥物的耐藥性問題。
　　本文對中間體和偶合方法進行了探索，將不同類型的中間體連在DAAN母核B環(huán)的2-或4-位上，共計合成20個二芳基苯胺類衍生物，并對新合成的二芳基苯胺類衍生物進行了抗HI

5、V病毒活性和代謝穩(wěn)定性評價，其中活性化合物16個，經活性及類藥性評價得構效關系如下：
　　1）在DAAN的B環(huán)4-位進行連接側鏈，取代基R2較長或者連接基團極性增大，都會使活性降低；引入短鏈可以保持或者改善分子的抗HIV活性，在分子抗耐藥方面的表現短鏈優(yōu)于長鏈。
　　2）在人肝微粒體模型代謝穩(wěn)定性試驗當中，二芳基苯胺類化合物中B環(huán)2-位酰胺基取代的化合物比B環(huán)4-位酰胺取代的化合物更易不穩(wěn)定，且B環(huán)4-位酯鍵修飾要比酰胺鍵側

6、鏈更不穩(wěn)定。
　　3）在DAAN類中B環(huán)2-位氨基上連接脂肪鏈R1后，均會減弱DAAN母核的抗HIV活性，游離出氨基，抗HIV活性最好，這也與前其研究結論一致，此位點與K101的氨基酸殘基能產生作用，是抗HIV病毒的活性關鍵基團。
　　經探索合成3個DAAN與BVM雙靶點偶合物，并沒有檢測到抗HIV活性，對中間體的嘗試還有待提高。由人肝微粒體代謝穩(wěn)定性試驗可知，雙靶點化合物的代謝半衰期t1/2均明顯小于參比對照鹽酸普奈洛爾和

7、TMC278，說明雙靶點化合物能夠在酶的參與下發(fā)生代謝。相對應的DAAN中間體也進行了代謝穩(wěn)定性考察，代謝半衰期t1/2分別為10.7 min，75.3 min，117.5 min。暗示在DAAN類的B-環(huán)2-位的氨基連接側鏈的長度越長，越容易被代謝，可以指導中間體的進一步探索。
　　綜上所述，本課題經探索合成了非核苷類逆轉錄酶抑制劑與HIV成熟抑制劑BVM的雙靶點化合物，且在肝微粒體酶作用下易代謝，為后期對其活性的優(yōu)化奠定了基礎