基于免疫反應的高靈敏檢測方法的建立.pdf

1、由于量子點及碳納米管(CNTs)獨特的納米特性及生物兼容性，它們在免疫分析領域被廣泛應用。本論文分別構建了兩種基于免疫反應的高靈敏檢測方法。基于聚合量子點的超靈敏免疫印跡方法(western blot)用以對復雜蛋白樣品進行分析檢測，碳納米管一紙免疫傳感器對水中的微囊藻毒素進行檢測。
　　 一種免疫方法是：基于量子點的超靈敏蛋白檢測免疫印跡方法。碲化鎘(CdTe)量子點由于它獨特的光學及生物特性，被廣泛應用于生物化學標記領域。本

2、論文構建了一種基于量子點的超靈敏蛋白檢測免疫印跡方法。由于親和素功能化的聚合量子點的高親和性及對檢測步驟的簡化，使得量化免疫印跡方法成為現(xiàn)實。為了制備聚合量子點，首先需要用生物素化的變性牛血清白蛋白(dBSA)包裹量子點，然后通過生物素與親和素的相互作用，量子點相互偶聯(lián)生成聚合量子點。經(jīng)過一系列的修飾，碲化鎘量子點的熒光強度顯著增強。把聚合量子點作為免疫印跡的標志物，其追蹤微量蛋白比傳統(tǒng)染料更靈敏。以蛋白A為例，對基于聚合量子點的免疫印

3、跡方法進行驗證，檢測線性范圍為30pg到1.5ng，檢測限達0.84pg。最終在聚偏二氟乙烯膜上的熒光信號至少可以保持40min。進行實際樣品檢測時，回收率達99.9％到103.0％。
　　 另一種方法是紙—單壁碳納米管復合物組成的，簡單且高效的傳感器。碳納米管傳感器的電阻取決于碳納米管網(wǎng)絡之間的間隙寬度，該方法能很好的滿足常規(guī)毒素的檢測要求。本論文對微囊藻毒素進行了檢測并建立了標準曲線，線性范圍為1.25nmol/L到10nm