中藥清毒栓對宮頸癌SiHa細胞凋亡的影響及其相關(guān)實驗研究.pdf

1、目的：通過對中藥清毒栓體外作用于人宮頸癌SiHa細胞對其凋亡的影響的實驗研究，探討中藥清毒栓防治宮頸癌的作用機制，進一步完善中藥清毒栓臨床運用的理論依據(jù)。
　　方法：
　　1.利用氯仿(三氯甲烷)提取法提取中藥清毒栓中的有效成分。
　　2.體外培養(yǎng)人宮頸癌SiHa細胞，將中藥清毒栓分為高中低三個劑量組，分別作用于宮頸癌SiHa細胞24h、48h、72h，并另設(shè)置空白對照組及中藥保婦康栓組，通過CCK-8檢測法檢測出高中

2、低不同濃度組及不同時間點中藥清毒栓對宮頸癌SiHa細胞體外增殖的影響，檢測出OD值，確定最佳時效點，以支持下一步實驗。
　　3.線粒體膜電位檢測細胞凋亡實驗：運用JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒檢測不同濃度中藥清毒栓作用宮頸癌SiHa細胞后的增殖抑制狀態(tài),從而更進一步了解中藥清毒栓誘導(dǎo)細胞的凋亡途徑。
　　4.流式細胞檢測法檢測細胞凋亡實驗：利用annexin-V/PI試劑盒中的熒光探針來檢測不同濃度藥物作用宮頸癌SiHa細胞

3、凋亡及對其細胞周期影響的情況。
　　結(jié)果：高劑量清毒栓在48h時對宮頸癌SiHa細胞增殖具有明顯的抑制及誘導(dǎo)細胞凋亡的作用,并可將宮頸癌SiHa細胞阻滯于G0/G1期；與空白對照組及清毒栓中，低劑量組比較，差異具有顯著性差異(P<0.01)，清毒栓高劑量與保婦康栓對照組比較，無顯著性差異(P>0.05)。
　　結(jié)論：中藥清毒栓可通過將宮頸癌SiHa細胞阻滯于細胞周期G0/G1期而促進宮頸癌SiHa細胞的凋亡抑制其增殖，從而達