S1在耐藥乳腺癌細(xì)胞中的分子藥理研究.pdf

1、碩士學(xué)位論文S1在耐藥乳腺癌細(xì)胞中的分子藥理研究ThepharmacologicalmechanismofS1ondrug—resistantbreastcancercells作者姓名：梁苤鎣學(xué)科、專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)號(hào)：2叢8DO王——指導(dǎo)教師遠(yuǎn)墮亟送圭超副塾拯完成日期_地!Q6DalianUniversityofTechnology大連理工大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要惡性腫瘤對(duì)化療藥物多藥耐藥性的產(chǎn)生是困擾著各種腫瘤治療的共同難題，

2、在乳腺癌的治療中，它同樣也是導(dǎo)致化療失敗的重要原因。MCF7／ADR是在藥物敏感的乳腺癌細(xì)胞系MCF7的基礎(chǔ)上，經(jīng)化療藥物阿霉素長(zhǎng)期誘導(dǎo)形成的多藥耐藥細(xì)胞系，它常被研究者們作為多藥耐藥的模型來尋求有效的治療藥物。BH3模擬物作為抗腫瘤新的治療策略，能夠通過競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合Bcl2家族抗凋亡蛋白的BH3疏水溝槽，釋放和激活促凋亡蛋白Bax／Bak，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。其中S1(3硫嗎啉基8氧8H苊并[1，2b]nl￡咯9腈)已經(jīng)被證明是一種低毒、高

3、效的抗腫瘤抑制劑。Sl具有廣譜的抗腫瘤活性，能以高的親和力結(jié)合Mcl1與Bcl2蛋白(58nM；310nM)，S1是一個(gè)特異的BH3模擬物，沒有Bcl2家族以外的靶點(diǎn)，只通過線粒體通路誘導(dǎo)完全依賴Bax／Bak蛋白的細(xì)胞凋亡。研究表明，BH3模擬物能夠在多種耐藥的腫瘤細(xì)胞中誘導(dǎo)凋亡。因此，BH3模擬物可能為腫瘤多藥耐藥的治療提供新的方案。本論文對(duì)BH3模擬物S1在多藥耐藥的乳腺癌細(xì)胞系MCF7／ADR中的分子藥理機(jī)制進(jìn)行了研究。本研究以

4、藥物敏感乳腺癌細(xì)胞系MCF7和多藥耐藥細(xì)胞系MCF7／ADR為研究對(duì)象，首先通過MTT實(shí)驗(yàn)，Western免疫檢測(cè)法等細(xì)胞生物學(xué)的方法證明，S1主要通過激活Bak蛋白高效誘導(dǎo)MCF7和MCF7／ADR細(xì)胞凋亡，并且在MCF7／ADR細(xì)胞中，S1表現(xiàn)出更高的凋亡誘導(dǎo)活性。另外，S1能夠在MCF7細(xì)胞中誘導(dǎo)Bcl2蛋白發(fā)生磷酸化(pBcl2)，體外FP實(shí)驗(yàn)和基于細(xì)胞的Western免疫法實(shí)驗(yàn)證明，S1不能拮抗pBcl2蛋白。然后進(jìn)一步的通過

5、Bax／Bak的釋放與激活實(shí)驗(yàn)證明，S1在MCF7細(xì)胞中誘導(dǎo)產(chǎn)生的pBcl2，賦予了其對(duì)S1的相對(duì)抗性，而在MCF7／ADR細(xì)胞中此作用的缺失是導(dǎo)致其對(duì)S1作用更加敏感的原因。在此基礎(chǔ)上，通過S1在MCF7細(xì)胞和MCF7／ADR細(xì)胞中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激研究實(shí)驗(yàn)證明，S1誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的差異是導(dǎo)致兩株細(xì)胞中pBcl2水平不同的原因。ERK特異性的抑制劑PD98059與S1的聯(lián)合作用證明，由S1在MCF7細(xì)胞中誘導(dǎo)產(chǎn)生的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對(duì)該細(xì)胞的保護(hù)作